关于客户在收到细胞后正确的处理方法
NIH/3T3小鼠胚胎细胞
有经验和刚刚从事细胞培养工作的人员都应该认真仔细地询问下细胞提供方提供的建议,提前了解所要培养细胞的详细资料,准备好细胞所要用到的培养基和相关试剂,虽然所有的贴壁,半贴壁或者悬浮细胞处理方式差不多,但是不同的实验室培养条件和处理力度还有试剂的批间差这些问题存在,也会导致对细胞处理不当,或者环境的不适应而造成细胞的死亡。
NIH/3T3小鼠胚胎细胞
1.收到细胞,*时间要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如293T,平时贴壁就不是很牢,在装满的培养基瓶子里面,会发生大片的脱落,细胞聚集在一起,但是细胞生长还是正常的,通过离心收集,加以*的消化,重新打散,又可以正常的贴壁生长。
NIH/3T3小鼠胚胎细胞
2.当通过上一步的观察,细胞初步没有任何问题时,进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时,则处理如下:弃除瓶中大部分培养基,仅保留5到10mL培养所需的常规培养基;或更换新鲜的培养基,置于培养箱中,随后每天观察。细胞在低于正常生长温度情况下,会调整为静止期,或者慢速生*,必须恢复37度的环境至少3个小时左右,才能重新调整到接近对数生*的状态,在对数生*进行细胞的传代会大大增加传代的成功率,和细胞的存活率。
NIH/3T3小鼠胚胎细胞
3.如果经*步观察发现细胞密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快,状态稳定,不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶;对于生长较慢,细胞比较薄,状态容易波动的细胞类型,一次少传些,保证每瓶细胞密度大些,便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞,*次处理也可以依照第二种情况。
NIH/3T3小鼠胚胎细胞,还可供应细胞如下:
P388D1 | 小鼠淋巴样瘤细胞 |
P3X63Ag8 | 小鼠骨髓瘤细胞 |
P3X63Ag8.653 | 小鼠骨髓瘤细胞 |
PC-12(低分化) | 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化) |
PC-12(高分化) | 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化) |
PC-12(未分化) | 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化) |
RAG | 小鼠肾腺癌细胞 |
RBL-2H3 | 大鼠嗜碱性细胞白血病细胞 |
RH-35 | 大鼠肝癌细胞 |
SHZ-88 | 大鼠乳腺癌细胞 |
UMR-106 | 大鼠骨肉瘤细胞 |
Y3-Ag1.2.3 | 大鼠骨髓瘤细胞 |
MFC | 小鼠胃癌细胞 |
RAW264.7 | 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 |
HLF | 人胚肺 |
NRC-5 | 人胚肺 |
HEK293-T | 人胚肾 |
HEK293-L | 人胚肾 |
Phix-293T | 人胚肾细胞(Ad5DNA化) |
L-02 | 人肝细胞 |
HUVEC | 人脐静脉血管内皮原代细胞 |
HUVEC | 人脐静脉血管内皮细胞株 |
WI-38 | 人正常肺、成纤维细胞 |
BJ | 人正常皮肤,成纤维细胞 |
HPF-1 | 人胚胎皮肤纤维细胞 |
张肝 | 人正常肝 |
LO2 | 人正常肝 |
WRL-68 | 人正常肝 |
293(代号Cui-1) | 人胚肾 |
293NS | 人胚肾 |
293-C18 | 人胚肾 |
293 | 人胚肾 |
293FT | 人胚肾细胞-用于慢病毒包装 |
293TN | 人胚肾细胞--用于慢病毒包装 |
293AV | 人胚肾细胞-用于腺病毒包装 |
293T | 人胚肾细胞 |
GES-1 | 人胃上皮细胞 |
MCF-10A | 人正常乳腺上皮细胞 |
HEK293 | 人胚肾细胞 |
HL-7702 | 人正常肝细胞 |
RWPE-1 | 人正常前列腺上皮细胞 |
MRC-5 | 人胚肺成纤维细胞 |
LX-2 | 人肝星形细胞 |
ED-25 | 人肝静脉内皮细胞 |
Chang liver | 人张氏肝细胞 |
HEEC | 人食道上皮细胞 |
16HBE | 人支气管上皮细胞 |
NP69 | 人永生化鼻咽上皮细胞系 |
EA.hy926 | 人脐静脉细胞融合细胞 |
ECV304 | 人脐静脉内皮细胞 |
293ebna | 人胚肾细胞 |
HK2 | 人肾小管上皮细胞 |
HEB | 人脑胶质细胞株 |
HSC | 人雪旺细胞 |
HaCaT | 人永生化表皮细胞 |
HKF | 人瘢痕疙瘩成纤维细胞 |
293 Cells,low passage | 人胚肾细胞 |
2V6.11 | 人胚肾细胞 |
AAV-293 | 人胚肾细胞 |
Changliver | 人张氏肝细胞 |
HA | 人羊膜细胞 |
HBL-100 | 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞 |
HFL1 | 人肺成纤维细胞 |
hFOB 1.19 | 人SV40转染成骨细胞 |
HMy2.CIR | 人B淋巴母细胞 |
QSG-7701 | 人肝细胞 |
SV-HUC-1 | 人膀胱上皮永生化细胞 |
THLE-3 | 人肝永生化细胞 |
WISH | 人羊膜细胞 |
WPMY-1 | 人正常前列腺基质永生化细胞 |
HK-2 | 人肾小管上皮细胞 |
L02 | 人正常肝细胞 |
hFOB1.19 | 人永生化成骨细胞 |
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