多聚半乳糖醛酸酶活性测定样本前处理操作-齐一生物

多聚半乳糖醛酸酶酶活测定意义
多聚半乳糖醛酸酶（EC3.2.1.15）是一种细胞壁结合蛋白，可以催化果胶分子中 α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解，参与果胶的降解，使细胞壁结构解体，导致果实软化，与果实成熟、叶和花的脱落、病原物防御，细胞伸展发育以及木质化有关，在植物抗病性和食品贮藏保鲜领域具有较高的研究价值。
多聚半乳糖醛酸酶酶活测定原理
多聚半乳糖醛酸酶水解果胶酸生成半乳糖醛酸，具有还原性醛基，与 DNS 试剂反应生成红棕色物质，在 540nm 有特征吸收峰，测定 540nm 处吸光值变化可计算得多聚半乳糖醛酸酶活性。
多聚半乳糖醛酸酶酶活样本前处理的操作
1.组织：按照组织质量（g）  ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，
加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。16000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）  ：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议
500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 16000g，4℃离心 10min，取上清置于冰上待测。
3.培养液：直接检测。

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