中性、碱性土壤*磷试剂盒说明书齐一生物

For Research Use only

仅供研究用

货号：QYS-236035

微量法 100管/96样

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定

中性、碱性土壤*磷试剂盒说明书齐一生物测定意义

*磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷，土

壤中*磷是限制植物生长主要因子之一。

测定原理

用弱碱法提取酸溶性磷和吸附态磷，钼蓝与磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物质，通过测定660nm 光吸收，即可计算磷含量。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、震荡仪。

试剂组成和配制

提取液：液体 125mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加入 5mL 双蒸水，溶解后 4℃保存一周。

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加入 5mL 双蒸水，溶解后 4℃保存一周。

试剂三：液体 5mL×1 瓶，室温保存。

标准品：10μmol/mL 标准磷贮备液 1mL×1 支，4℃保存。工作液：35mL 棕色空瓶×1 瓶。

工作液（定磷剂）的配制：按 H2O：试剂一：试剂二：试剂三=2:1:1:1 的比例配制，配好的工作液应为浅黄色。若变色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，工作液应现配现用。

注意：配试剂用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。

样本处理

新鲜土样风干，过 30-50 目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为 1：20 的比例（建议

称取约 0.05g 土样，加入 1mL 提取液），振荡提取 1h，10000g  ，25℃离心 10min，取上清液待测。

中性、碱性土壤*磷试剂盒说明书齐一生物测定步骤

1、 测定步骤：

1、 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 660nm，蒸馏水调零。

2、 将 10μmol/mL 标准液用提取液稀释为 6、4、2、1、0.5、0.25μmol/mL 的标准溶液备用。

3、 操作表：(在 1.5mL 离心管中或 96 孔板依次加入下列试剂)

计算公式

1、 标准曲线的绘制：

以各个标准溶液的浓度为 x 轴，其对应的△A 标准为 y 轴，绘制标准曲线，得到标准方程 y=kx+b， 将△A 带入方程得到 x（μmol/mL）

2、 *磷含量的计算：

*磷含量（μmol /g 鲜重）=x×V 样÷（V 样×W÷V 样总）=x÷W。

V 样：加入样本体积，0.02mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g。

注意事项

1. 配好的显色液当天用完，变蓝则不能使用。

2. 低检出限为 0.2μg/mL。

中性、碱性土壤*磷试剂盒说明书齐一生物注：电子版说明书仅供参考、详情请参考试剂盒纸质版说明书。