小鼠维生素D3（VD3）ELISA试剂盒 返回列表页

小鼠维生素D3(VD3)ELISA试剂盒本试剂盒用于测定血清，血浆及相关液体样本中含量。
实验原理：
   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中该产品水平。用纯化的本产品抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入本产品抗原，再与HRP标记的本产品抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的本产品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中该产品浓度。
小鼠维生素D3(VD3)ELISA试剂盒试剂盒组成：
试剂盒组成    48孔配置    96孔配置    保存
说明书    1份    1份    
封板膜    2片（48）    2片（96）    
密封袋    1个    1个    
酶标包被板    1×48    1×96    2-8℃保存
标准品：1800ng/L    0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶    2-8℃保存
标准品稀释液    1.5ml×1瓶    1.5ml×1瓶    2-8℃保存
酶标试剂    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
样品稀释液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
显色剂A液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
显色剂B液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
终止液    3ml×1瓶    6ml×1瓶    2-8℃保存
浓缩洗涤液    （20ml×20倍）×1瓶    （20ml×30倍）×1瓶    2-8℃保存
标本要求： 
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1200 ng/L，800 ng/L ，400 ng/L，200ng/L， 100 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，使用排加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

小鼠维生素D3(VD3)ELISA试剂盒计算：
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，    
在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD      
值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释      
倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标      
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值      
代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释      
倍数，即为样品的实际浓度。                                                               
试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%     
保存条件及有效期：
1.试剂盒保存；2-8℃。
2．有效期：6个月
    小鼠维生素D3(VD3)ELISA试剂盒 齐一生物科技有限公司主要经营进口原装Elisa试剂盒，种类齐全，价格实惠，购买我公司产品的新老客户，可享免费代测实验服务，可检测人源，小鼠，大鼠，猪，狗，猴，兔，羊，鸡，牛，鸭子，鱼，植物等各种样本。全程提供。如有什么问题请给我们或者留言，告诉我您的需要，并留下您宝贵的意见和建议。

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08321241    Β-N-Acetylhexosaminidase    乙酰氨基己糖胺酶    0.5 U
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08321762    Ribonuclease Inhibitor    核糖核酸酶抑制因子    10 KU
08321801    Nuclease Sw    核酸酶    2 KU
08820361    Thrombin        10x1 KU
08820402    Thrombin        100 KU
0857047    Tryptase Activity: ≥ 5000    类胰蛋白酶    10 µg
08320231    Chondro-4-Sulfatase    软骨硫酸酯酶    4x1.6 U
08320241    Chondro-6-Sulfatase    软骨硫酸酯酶    2.5 U
02101467.1    Cytochrome C    细胞色素C    100 mg
02101467.2    Cytochrome C    细胞色素C    250 mg
02101467.5    Cytochrome C    细胞色素C    500 mg
    Cytochrome C    细胞色素C    1 g
    Β-Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate    β-NADP,细胞培养级别    50 mg
    Β-Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate    β-NADP,细胞培养级别    250 mg