脂肪酸代谢系列_丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒
测定方法：微量法
产品规格：100管/96样
注 意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
PDC主要存在于酵母中，是乙醇发酵的关键酶之一，催化丙酮酸脱羧生成乙醛。
脂肪酸代谢系列_丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒
测定原理：
PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛，添加乙醇脱氢酶（ADH）来进一步催化 NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+；NADH在340 nm有吸收峰，而NAD+没有；通过测定340 nm光吸收下降速率，来计算PDC活性。
自备仪器和用品：
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体18mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体2.5mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1支，﹣20℃保存。
试剂五：液体30μL×1瓶，﹣20℃保存。
混合试剂：临用前配制，将试剂四和试剂五转移至试剂三中充分溶解待用，用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂六：液体2mL×1管，4℃保存。
粗酶液提取：
1、细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率200W，工作3s，间歇10s，工作35次），16000g 4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
2、组织处理：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，16000g 4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
PDC测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二置于25℃水浴中预热30min。
3. 空白管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL蒸馏水、20μL混合试剂、140μL试剂二和20μL试剂六，迅速混匀后于340nm比色，记录15s和75s的吸光值，分别记为A1和A2。
4. 测定管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL上清液、20μL混合试剂、140μL试剂二和20μL试剂六，迅速混匀后于340nm比色，记录15s和75s的吸光值，分别记为A3和A4。
注意：空白管只需测定一次。
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