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尼氏染色实验代测

尼氏染色原理：

神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒，即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质，也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和胞体的轴丘。尼氏体会因为生理状态的变化而变化，尼氏体是神经元内蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，胞体内的尼氏体会明显减少。通常尼氏体能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。

尼氏染色说明：

1、细胞可做染色，贴壁细胞做爬片后染色，悬浮细胞做滴片后染色。

2、拍照倍数分100倍，200倍，400倍。正常情况下拍照是200倍3张，400倍3张。

3、全景扫描可看任意倍数。

实验操作步骤（仅供参考）

1、常规脱蜡至水（二甲苯I、二甲苯II各15min，然后梯度酒精脱水：100%I、100%II、95%、90%、80%、70%、50%各5min）

2、蒸馏水冲洗3次，每次5min

3、然后置于60℃温箱用1%甲苯胺蓝染色40 min(或用焦油紫染色30s)

4、蒸馏水洗净染料后，于分别置于70%，80%和95%以及100%乙醇中脱水，再用二甲苯透明

5、后用中性树胶封片。

尼氏染色实验代测