5ML 蛋白A纯化预装柱，5ML 产品描述

天然蛋白A（Protein A）是一种发现于*的细胞壁表面蛋白，与分离自G型或C型链球菌属的蛋白G类似，主要通过与免疫球蛋白（Ig）的Fc区相互作用，结合大多数哺乳动物的IgG，可用于多种抗体（单抗和多抗）的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上，ProteinA 和Protein G结合性能不太一样（详见附录1）。

5ML 蛋白A纯化预装柱，5ML 运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存，2年有效。

需准备试剂

【注】：建议以下缓冲液在使用前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。

结合/洗杂缓冲液：0.15M NaCl, 20mM Na2HPO4, pH7.0

洗脱缓冲液：0.1M*，pH 3.0

中和液：1M Tris-HCl，pH 8.5

使用方法

【注】：上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值，可以用结合/洗涤缓冲液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释，或者样品用结合/洗涤缓冲液透析。

1样品纯化（以Akta系统为例）

1）准备：将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。

2）清洗：3-5倍柱体积去离子水冲洗层析柱中储存液。

3）平衡：用5倍柱体积的结合Buffer平衡层析柱，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。

4）上样：将样品加到平衡好的层析柱中，*流速1-5ml/min，保证目的蛋白与树脂充分接触，提高目的蛋白的回收率，收集流出液，待检测。

【注】：样品的粘度增加使得即使上样体积很少，也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压，使得进样器更难使用。

5）洗杂：用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，直到紫外吸收达到一个稳定的基线，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

6）洗脱：用洗脱Buffer 采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中，通常5倍柱体积洗脱液足够将目的蛋白洗脱下来。也可以用一个小的梯度，例如20倍柱体积或更多，来分离不同结合强度的蛋白质。

7）清洗及保存：依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，zui后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被细菌污染。

2 SDS-PAGE检测

将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。

3 树脂清洗

随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量下降，影响柱子的性能，这时需对柱子进行清洗：

1）去除沉淀或变性物质

① 用2倍柱体积的6M 盐酸胍溶液进行清洗；

② 用5倍柱体积的PBS，pH 7.4 清洗。

2）去除由于疏水性吸附造成的非特异吸附物质

① 用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积的1% Triton? X-100清洗；

② 用5倍柱体积的PBS, pH 7.4 清洗。

kl-13866R CERD4CERD4蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13867R CES1P1CES1P1蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13868R CES2羧酸酯酶2抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13869R CES3羧酸酯酶3抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13870R CES4A羧酸酯酶4A抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13871R CES6羧酸酯酶6抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13872R CezanneCezanne蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13873R CFC1内脏移位线管蛋白CFC1蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13874R CFHL2补体因子H相关蛋白2抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13875R CFHL4补体因子H相关蛋白4抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13876R CFHL5补体因子H相关蛋白5抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13877R CG028/C7orf28A7号染色体开放阅读框28A抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13878R CGBPCpG结合蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13879R CGGBP1CGG结合蛋白1抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13880R CGK2cGMP依赖性蛋白激酶2抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13881R CGNL1结蛋白样蛋白CGNL1抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13882R CGREF1细胞生长调节蛋白CGREF1抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13884R CHAD富含*软骨蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13885R CHADL软骨蛋白样蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13887R CHCHD3卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD3抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13888R CHCHD10卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD10抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13889R CHCHD7卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD7抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
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kl-18891R CHD1L染色质解旋酶DNA结合蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13892R CHD2染色质解旋酶DNA结合蛋白2抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-18893R CHD3染色质解旋酶DNA结合蛋白3抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13893R CHD4染色质解旋酶DNA结合蛋白Mi2β抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13894R CHD6ATP依赖的解旋酶CHD6抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13895R CHD7ATP依赖的解旋酶CHD7抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13896R CHD8ATP依赖的解旋酶CHD8抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
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kl-13898R CHERP钙稳态内质网蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
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kl-13900R CHIA哺乳动物酸性几丁质酶抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13902R CHID1几丁质酶结构域蛋白1抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13903R Chimaerin 2嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-13904R CHIT1几丁质酶1抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
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kl-7125R Claudin 2紧密连接蛋白2抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-8482R Claudin 7紧密连接蛋白7抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-15152R C2orf53 2号染色体开放阅读框53抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-15153R C2orf542号染色体开放阅读框54抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-15154R C2orf562号染色体开放阅读框56抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-15155R C2orf612号染色体开放阅读框61抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-4763R CA153乳腺癌相关抗原抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5113R CDCA4细胞分裂周期相关蛋白4抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5115R Cytochrome b5细胞色素b5抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-2377R CNR2钙粘蛋白相关的神经受体2抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-15046R C1orf1861号染色体开放阅读框186抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-8871R CXCL16CXC趋化因子16抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-4878R Complement C3c alpha' chain fragment 2补体C3cα片段2抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-4874R Complement C3c alpha' chain fragment 1补体C3cα 链片段1抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-4875R Complement C3dg fragment补体C3dg片段抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-4876R Complement C3g fragment补体C3g片段抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-4877R Complement C3d fragment补体C3d片段抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-8865R CD28CD28抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5128R CAPZA2F肌动蛋白α2亚基抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5135R CREM*反应元件调节蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5114R Cystatin A胱抑素A/半*蛋白酶抑制剂A抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5112R CLIC1氯离子通道蛋白27抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5016R Claudin 8紧密连接蛋白8抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5241R Phospho-Caspase-9 (Ser196)磷酸化半*蛋白酶9抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5245R phospho-Cdc25B (Ser353)磷酸化细胞分裂周期蛋白25B抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5228R phospho-CDKN1B (Thr157)磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5229R phospho-CDKN1B (Thr187)磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5236R phospho-CDKN1B (Ser178)磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5237R phospho-CDKN1A (Thr145)磷酸化p21蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5238R phospho-CDKN1A (Thr57)磷酸化p21蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-15304R c8orf848号染色体开放阅读框84抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5239R phospho-CDKN1A (Ser146)磷酸化p21蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-3060R Phospho-CEBP alpha (Ser21)磷酸化转录调节因子CEBP α 抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-2683R CLEC2DCLEC2D蛋白抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-8185R CRELD2富含半*与表皮生长因子样蛋白2抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-8186R CRYZL1醌氧化还原酶样蛋白1抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-8180R COMMD9铜代谢结构域蛋白9抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-7734R CAPD3浓缩素2复合亚基D3抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5246R phospho-Cdc6 (Ser54)磷酸化细胞分裂周期蛋白6抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-5247R Phospho-cdc2 (Ser39)磷酸化周期素依赖激酶2抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-6025R CA12碳酸酐酶12抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-3813R CDC34B泛素载体蛋白R2抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
kl-6027R CADM3细胞粘附分子3抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml