军团菌属通用PCR试剂盒步骤 返回列表页

以下是军团菌属通用PCR试剂盒步骤的详细说明书：

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军团菌属通用PCR试剂盒步骤注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
需要自备的器材：
1．军团菌属通用PCR试剂盒步骤仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
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 麦康凯琼脂基础(SMAC)2550g用于致病性大肠杆菌(包括O7)的分离培养(SN/T0973-2000和SN/T2006)。

Peptone-E (Gelatin Peptone) 蛋白胨 E 100g incubation media Peptone-E (Gelatin Peptone) 蛋白胨 E 100g

谢瓦曲霉 支/瓶

DextroseAgar

ArginineBrothacc.ToSchubert

SCHAEDLER琼脂250g用于厌氧菌的分离培养

BETA-SSA琼脂 BETA-SSA Agar 用于链球菌的选择性分离培养

假单胞分离琼脂 Pseudomonas Isolation Agar 250 用于假单胞菌群的测定

葡萄糖蛋白胨培养基250g/瓶用于真菌和腐生菌的检验incubationmedia葡萄糖蛋白胨培养基250g/瓶用于真菌和腐生菌的检验

2216ELiquidMedium

NBB培养基250g用于啤酒中厌氧菌检测

乳酸杆菌肉汤培养基 Lactobacillus broth Medium 用于乳酸杆菌增菌培养

EYA培养基基础 Egg Yolk Agar Medium Base 250克 肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养

碎肉培养基250g/瓶用于痤疮杆菌的培养，不含维生素K，需添加(庖肉牛肉粒)incubationmedia碎肉培养基250g/瓶用于痤疮杆菌的培养，不含维生素K，需添加(庖肉牛肉粒)

THBMedium

子宫成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

CGA Others Human 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人细胞裂解液 (阳性对照)

叙利亚仓鼠皮肤细胞;GH-S1

人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株;7WML6.0 癌细胞，MDA-MB-453细胞 GIK细胞，草鱼肾细胞系

人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1

HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)

DCS 小鼠树突状细胞肉瘤细胞

成骨细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

人脉络丝表皮细胞 (HCPEpiC)( 5×105 )

人皮肤鳞癌细胞;A-431 [A431] 大鼠小肠粘膜上皮细胞*培养基 100mL

大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3

EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人细胞裂解液 (阳性对照)

军团菌属通用PCR试剂盒步骤BIU-87   人浅表性膀胱癌细胞

BT474   人导管癌细胞

BxPC-3   人原位胰腺腺癌细胞

C26瘤   结肠癌

使用方法：
注：军团菌属通用PCR试剂盒步骤所有试剂使用前需*解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。
2.加样（样本处理区）
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。