极小棒杆菌探针法PCR荧光定量试剂盒 返回列表页

产品及特点： 
荧光定量PCR是在PCR体系中加入荧光化合物(荧光染料或荧光探针)。利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，使每个循环变得“可见”。本产品就是以探针法荧光定量 RT-PCR 技术为基础开发的专门检测鲍疱疹样病毒探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒。

运输及保存： 低温运输，-20℃保存，保存期限为12个月。
自备试剂：样品 RNA。
分类：荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费。
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
染料法
探针法　
可进行相对，定量表达分析，定性分析，SNP检测等
实验报告
电泳图   ·标准曲线 
溶解曲线 ·扩增曲线
完整的实验过程、试剂、仪器及分析报告
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使用方法
一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的 DNA 段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 RT-PCR 模板稀释液，用带芯枪头，下同）。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 RNA 的制备
7. 如果有N个样品，设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
8. 用自选方法纯化样品的RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容。也以选购本公司的柱式病毒RNAout。本试剂盒免费赠送20次免RNA提取的核酸释放剂试用装，该释放剂的裂解液可以直接作为RT-PCR模板，省略了RNA提取步骤。
三、Probe qRT-PCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR 管，其中N+2个用于上步得到的 N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做1次重复，则标记N+4 个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（用第4号管的阳性对照稀释液做模板）。下面只以定量分析为例描述操作步骤。
10. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）
*MEM培养基/伊格尔培养基/伊格尔限必需培养基/MEM/SMEM 2'-Deoxyguanosine 5'-triphosphate trisodium salt

3-氯-4-吡啶甲酸乙酯DMEM培养基/DME培养基/DMEM 2'-Deoxycytidine 5'-triphosphate disodium salt

2-硝基间苯二甲酸M9肉汤/M9 Broth 2'-deoxythymidine-5'-triphosphate (dTTP),3sodium salt, dihydrate

3-氨基-4-哒羧酸M9CA肉汤/M9CA Broth 2'-Deoxyuridine

2-氯-5-溴-3-三氟甲基吡啶M63肉汤/M63 Broth Thymidine

3-氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯F12培养基/F-12营养混合物/Hamˊs F12/F-12 Nutrient Mixture 2'-Deoxyguanosine monohydrate

5-氨基-3-氟苯DMEM/F12培养基/F-12（DMEM） 2'-Deoxycytidine;2'-dC

5-溴吡-2-羧酸甲酯199培养基/M199培养基/M199 Medium 2'-Deoxycytidine;2'-dC

5-溴吡-2-羧酸甲酯1640培养基/1640 Medium/RPMI 1640 2'-Deoxyadenosine monohydrate

*Hanks’平衡盐/淋巴细胞洗涤液/Hank′s液/Hanks’ Balanced Salt solution DNA, Fishsperm

2--3-氨基吡啶IMDM培养基/IMDM DNA from salmon sperm

*一水合物高氏合成一号琼脂培养基/GAUZEˊs  Medium  5-Fluoro-2'-deoxycytidine

5-甲氧基*XM-G琼脂培养基/XM-G Agar 5-Fluoro-2'--deoxyuridine

戊酸酐半固体琼脂发酵管 Guanosine

4-溴吡啶-2-氨酸叔丁酯卫矛半固体发酵管 Guanosine
极小棒杆菌探针法PCR荧光定量试剂盒β-1,4-半乳糖转移酶1(β4GALT1)(酶联免疫吸附试验法)* 质量规格：>98.5%,分子生物学级6次/盒

Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTXⅠ)(酶联免疫吸附试验法)*(标准品) 质量规格：>95%,分子生物学级1ml（500X）

黑素瘤细胞黏附分子(MCAM)(酶联免疫吸附试验法)盐酸洛贝林 质量规格：>98%,分子生物学级6次/盒

血管内皮生长因子A(VEGFA)(酶联免疫吸附试验法)氯尼达明 质量规格：BR,100 um500 ml

含Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)(酶联免疫吸附试验法)氯尼达明 质量规格：BR500 ml

AMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)(酶联免疫吸附试验法)氯尼达明 质量规格：>99%,BR6次/盒

硝基*(NT)(酶联免疫吸附试验法)氯尼达明 质量规格：BR1ml（500X）

*过氧化酶1(GPX1)(酶联免疫吸附试验法)洛匹那韦 质量规格：>98%,分子生物3×1ml