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MPO DRGelisa试剂盒说明书

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更新时间:2019-01-14 11:15:56浏览次数:423次

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三、提供全程技术指导。

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MPO DRGelisa试剂盒说明书

Rat MPO  ELISA Kit

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大鼠髓过氧化物酶 (MPO)DRGelisa试剂盒 Rat MPO  ELISA Kit
MPO DRGelisa试剂盒说明书【实验用途】髓过氧化物酶(MPO)是一种血色素蛋白(分子质量 118kDa),含一对重链和轻链 ,它存于嗜中性多核细胞的嗜天青颗粒和巨嗜细胞中,其功能为将氯化物和过氧化氢转变为次氯酸盐。在炎症状态下,它被释放入细胞外液进入循环,因此传统认为是一种杀菌的酶,在人体的天然防御 、免疫功能方面起重要作用。此酶参与含低密度脂蛋白(1ow density li—poprotein,LDL)的脂类氧化。以邻位二氨基苯胺盐酸盐为底物加过氧化氢可定量血中和组织中的酶活性。MPO能氧化低密度脂蛋白(1ow density lipoprotein cholesterol,LD—LC),从而有利于巨噬细胞摄取LDLC并转变为泡沫细胞 ;氧化高密度脂蛋白(hi density lipoprotein,HDL),使其失去正常的功能;另外,MPO激活金属蛋白酶、使粥样硬化斑块表 面不稳定趋于破裂;同时 MPO还催化消耗 内皮衍生的一 氧化氮(nitric oxide,NO),从而减少 NO的生物利用度,损害 N0的血管扩张和抗炎功能Is]。关于 MPO的测定方法有多 种,紫外分光光度比色法、流式细胞仪和免疫组织化学染色 法 用来检测循环中和组织中多形核细胞的 MPO活性,而 近期出现的酶联免疫的定量法可测定血液中MPO的浓度。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体,经(biotin)标记。样品和标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。

操作流程:
(1)MPO DRGelisa试剂盒说明书待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
试剂盒组成及试剂配制 :
1.MPO DRGelisa试剂盒说明书 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。 
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
白介素6IL6检测试剂盒 规格: 48T/96T

白介素6IL6检测试剂盒 规格: 48T/96T

白介素6IL6检测试剂盒 规格: 48T/96T

白介素6IL6检测试剂盒 规格: 48T/96T

白介素6IL6检测试剂盒 规格: 48T/96T

白介素6IL6检测试剂盒 规格: 48T/96T

周期素依赖性激酶抑制因子3CDKN3检测试剂盒 规格: 48T/96T

1PRM1检测试剂盒 规格: 48T/96T

2PRM2检测试剂盒 规格: 48T/96T

3PRM3检测试剂盒 规格: 48T/96T

夜盲蛋白NYX检测试剂盒 规格: 48T/96T

卷曲同源物1FZD1检测试剂盒 规格: 48T/96T
pET-43.1a(+) 2 ug pET-43.1a(+) 低温运输,-20℃保存

pET-44 Ek/LIC 2 ug pET-44 Ek/LIC 低温运输,-20℃保存

pET-44a(+) 2 ug pET-44a(+) 低温运输,-20℃保存

pET-45b(+) 2 ug pET-45b(+) 低温运输,-20℃保存

pET-46 Ek/LIC 2 ug pET-46 Ek/LIC 低温运输,-20℃保存

pET-48b(+) 2 ug pET-48b(+) 低温运输,-20℃保存

pET-49b(+) 2 ug pET-49b(+) 低温运输,-20℃保存

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pAAV-IRES-hrGFP 2 ug pAAV-IRES-hrGFP 低温运输,-20℃保存

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pEXP-Lib 2 ug pEXP-Lib 低温运输,-20℃保存

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MPO DRGelisa试剂盒说明书兔肺微血管内皮细胞原代细胞 * 10 µg

人毛细胞cDNA   HHDPC cDNA 原装/进口 5 x 10^5 cells/vial

人生发基质细胞cDNA   HHGMC cDNA  5 x 10^5 cells/vial

人外根壳细胞cDNA   HHORSC cDNA * 5 x 10^5 cells/vial

人内根壳细胞cDNA   HHIRSC cDNA 原装/进口 5 x 10^5 cells/vial

人淋巴内皮细胞cDNA   HLEC cDNA  20 reactions

人淋巴成纤维细胞cDNA   HLF cDNA * 200 µg

人口腔角质细胞cDNA   HOK cDNA 原装/进口 200 µg

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