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OxLDL DRGelisa试剂盒价格

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更新时间:2019-01-14 13:09:31浏览次数:479次

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OxLDL  DRGelisa试剂盒价格

Rat Oxidized low density lipoprotein, Ox-LDL ELISA Kit

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大鼠氧化型低密度脂蛋白 OxLDL DRGelisa试剂盒 Rat Oxidized low density lipoprotein, Ox-LDL ELISA Kit
OxLDL  DRGelisa试剂盒价格【实验用途】OxLDL, 氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein, Ox-LDL ) ,低密度脂蛋白(LDL)经氧化修饰形成的脂蛋白,称为氧化低密度脂蛋白(OxLDL)。LDL可能经历两种形式的修饰-衍化(MAD粘附于ApoB-100或者ApoB-100的糖基化)、氧化(ApoB-100被过氧化物降解),分别形成衍化的LDL和氧化的LDL。LDL核心的脂肪酸中含有大量不饱和脂肪酸olyunsaturated fatty acids,PUFAs)约占LDL总脂肪酸含量的35%~70%,所以容易发生自身氧化。LDL中的PUFAs在自由基或其他氧化剂作用下,生成脂类自由基,并能产生多的过氧化脂质,引起连锁的自由基链式反应,终生成多种反应性的醛。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体,经(biotin)标记。样品和标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。

操作流程:
(1)OxLDL  DRGelisa试剂盒价格待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
试剂盒组成及试剂配制 :
1.OxLDL  DRGelisa试剂盒价格 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。 
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
白介素12BIL12B检测试剂盒 规格: 48T/96T

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