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上海酶联生物研究所
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阅读：308发布时间：2012-9-7
来自中科院上海生科院营养科学研究所，哈佛医学院等处的研究人员利用吗啉寡核苷酸（morpholino-oligonucleotides ，MO）技术成功构建了Zip7 敲除斑马鱼模型，从中揭示锌转运蛋白Zip7在斑马鱼胚胎发育及维持锌离子稳态过程中发挥重要作用。
文章的通讯作者是上海生命科学研究院营养所王福俤研究员，王福俤博士研究组曾与美国密歇根大学、波士顿儿童医院等处科学家合作，在Nature杂志上阐明了TRPML1是一种二价铁离子（Fe2+ ）通道，今年研究组项目入选了国家自然科学基金杰出青年基金。
必需微量元素锌是机体多种酶的必需组分或激活因子, 参与DNA复制、蛋白合成、细胞分化等，与发育、脑功能、骨骼生长、免疫功能及生殖健康等密切相关，研究已发现锌稳态受SLC39A/Zip和SLC30A/ZnT两个锌转运家族调控。
王福俤在国外工作期间详细研究了SLC39A/Zip家族中ZIP1、ZIP2、ZIP3、ZIP4、ZIP5转运锌离子的功能及机制，并阐明了ZIP4突变导致小肠摄取锌离子障碍而引发人类遗传性疾病肠病性肢端皮炎的分子机理（Human Molecular Genentics,2004）。
Zip7是SLC39A/Zip家族成员，有研究发现Zip7主要分布在细胞高尔基体和内质网，对维持细胞生长与凋亡具有作用。然而之前有关Zip7的研究主要是在细胞水平进行的，Zip7对整个机体功能及发育的作用尚不清楚。
在这篇文章中，颜广、张玉超和俞俊磊等研究生在王福俤研究员的指导下利用morpholino-oligonucleotides （MO）技术成功构建了Zip7 knockdown斑马鱼模型。研究发现Zip7基因沉默以后胚胎发育异常，采用X射线荧光光谱技术（XRF）从整体水平观察了锌在机体中的分布规律，发现Zip7通过调控锌在机体不同组织和器官中的分布来影响机体发育，其作用部位主要是头部与眼睛。
MO技术是一种利用miRNA活性敲除、成熟敲除和特异控制的新技术。 miRNA的活性敲除通常利用靶向miRNA引导链的寡核苷酸。靶向miRNA的Morpholino oligonucleotides也能干扰miRNA的活性。单独利用这种技术很难控制敲除的特异性。然而，靶向未成熟miRNA的溶核加工位点（nucleolytic processing sites，编者译）的Morpholino，能够抑制miRNA的成熟。如此，靶向初级miRNA的成套的不重叠的Morpholino oligos，可以用于特异控制;如果靶向同一个miRNA的两个不重叠的oligo引发的表型相同，就能说明表型是由于靶miRNA的活性被敲除引起的，而非脱靶效应。
此外，在进行此项研究过程中，王福俤研究组与健康所科研人员合作，建立了微量元素代谢新基因的ENU化学诱变正向遗传学筛选平台，建成一次高通量（约3000个基因组）的斑马鱼金属离子代谢异常突变体筛选，已筛选出20余个对高浓度致死剂量锌离子、铜离子或镉离子呈抵抗或敏感的斑马鱼突变株，为进一步研究发现调控微量元素的新基因，理解金属代谢稳态的分子机制、明确微量元素稳态代谢紊乱相关疾病奠定了基础。
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