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广东环凯生物科技有限公司
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产品名称:水质(粪)大肠菌群检验纸片产品编号与包装规格:产品编号产品类型包装规格060030纸片10份/盒(10mL水样量纸片5袋,1mL水样量纸片10袋)060070纸片10份/盒(1mL水样量纸片15袋)产品用途:广泛应用于生活饮用水、饮用天然矿泉水的水源水、地表水和废水中总大肠菌群和粪大肠菌群的检测
产品名称:水质(粪)大肠菌群检验纸片
产品编号与包装规格:
产品编号 | 产品类型 | 包装规格 |
060030 | 纸片 | 10 份/盒(10mL 水样量纸片 5 袋,1mL 水样量纸片 10 袋) |
060070 | 纸片 | 10 份/盒(1mL 水样量纸片 15 袋) |
产品用途:广泛应用于生活饮用水、饮用天然矿泉水的水源水、地表水和废水中总大肠菌群和粪大肠菌群的检测。
水质(粪)大肠菌群检验纸片检验原理:
按 MPN法,将一定量的乳糖、指示剂(溴甲酚紫和 2,3, 5-氯化三苯基四氮唑即 TTC)以及营养成分等吸附于一定面积的无菌滤纸上,在特定的温度(37℃ 或 44.5℃)培养24h,当细菌生长繁殖时,产酸使 PH值降低,溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色。同时,产气过程相应的脱氢酶在适宜的 PH值范围内,催化底物脱氢还原 TTC 形成红色的不溶性三苯甲臜(TTF),即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点(或红晕)。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断,从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在,再通过查 MPN表 就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。
使用方法:
1、接 种:每个样品按三个10倍递减的不同接种量接种,每个接种量分别接种5袋纸片,共接种15袋纸片。
清洁水样(选用产品编号为 060030 的纸片),接种水样总量为55.5mL, 10mL水样量纸片5袋,每袋接种水样10mL,1mL水样量纸片10张,其中5张各接种水样1mL,另5袋各接种 1:10的稀释水样1mL。
受污染水样(选用产品编号为 060070 的纸片),接种3个不同稀释度的1mL稀释水样各5袋。接种水样应均匀滴加在纸片上,纸片充分浸润、吸收水样,然后用手在塑膜袋外侧轻轻抚平,做好标记,袋口朝上竖直放置于恒温培养箱培养。
2、培养:检测总大肠菌群时,在36℃-38℃条件下培养18~24h后观察结果;检测粪大肠菌群时,在44.5±0.5℃的条件下培养18~24h 后观察结果
3、结果判读:
(1)纸片上出现红斑或红晕且周围变黄,为阳性。
(2)纸片全片变黄,无红斑或红晕,为阳性。
(3)纸片部分变黄,无红斑或红晕,为阴性。
(4)纸片的紫色背景上出现红斑或红晕,而周围不变黄,为阴性。
(5)纸片无变化,为阴性。
4、结果报告:根据不同接种量的阳性纸片数量,查相应的 MPN 表(见 HJ 755-2015 附录 B),按公式(1)换算并报告 1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数:
公式(1):C=100×M/Q
C-水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度(MPN/L)
M-查 MPN 表得到的 MPN 值(MPN/100mL)
Q-实际水样接种量(mL)
100-为 10×10mL,其中,10 将 MPN 值的单位 MPN/100mL 转换为 MPN/L,10mL 为 MPN 表中接种量。
5、结果表示:测定结果保留二位有效数字,大于等于 100 时以科学计数法表示,结果的单位为 MPN/L。平均值以几何平均计算。
质量控制:
1,理化指标:加水后,纸片 pH 值 7.0-7.3。
2,本品接种下列菌株,置于温箱中培养 18-24h,结果如下:
指标 | 质控菌株及编号 | 培养温度 | 特征性反应 |
生长率 | 大肠埃希氏菌ATCC25922 | 36~38℃ | 纸片变黄,并在黄色背景上呈现红点或片状红晕。 |
ATCC6538 | 纸片保持紫色不变 | ||
大肠埃希氏菌ATCC25922 | 44.5±0.5℃ | 纸片变黄,并在黄色背景上呈现红点或片状红晕。 | |
产气肠杆菌ATCC13048 | 纸片保持紫色不变 |
储存条件与保质期:2-8℃避光贮存,并注意防潮,保质期一年,如发现纸片变为粉红色即为失败。
注意事项:
1、水样采集后 2h 内检测,否则,需 10℃以下冷藏并 6h 内送检,实验室接样后,应将样品放入 0-4℃冰箱并 2h 内测定。
2、为避免纸片加入水样后,短时间内变黄或退色,如果采集水样含有余氯或经过加氯处理,需在采样瓶灭菌前加入(0.1g/mL)0.2mL (10mg 可保证去除水样中 1.5mg 余氯,用量克根据水样实际余氯量调整);如果采集水样重金属含量较高,需在采样瓶灭菌前加入乙二胺四乙酸二钠(EDTA- Na2)溶液(0.15g/mL)0.6mL,以消除干扰。酸性样品,需在分析前按无菌操作要求调节样品的 pH 值至 7.0-8.0。
3、检测粪大肠菌群时,纸片接种后应立即放置于 44.5±0.5℃的恒温培养箱中培养,在常温下放置过久将影响检测结果的准确性。
4、质检报告可以登录环凯网站 , 打开“质检报告"页面,输入产品批号下载。
废物处理:检测之后带菌物品置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。
执行标准:Q/HK 0706-广东环凯微生物科技有限公司企业标准 微生物检验卡
参考文献:
1,《水和废水监测分析方法(第四版)》
2,GB/T 5750.12-2006 中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验法
3,GB 8538-2016 中华人民共和国国家标准 饮用天然矿泉水检验方法
4,HJ 755-2015 水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定 纸片快速法
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