台盼蓝染色服务 实验耗材 返回列表页

台盼蓝染色法的操作步骤

材料：

1、显微镜、玻片、盖玻片、滴管；

2、试剂：0.4%台盼蓝染液；

3、台盼蓝（Trypan blue）：0.4g；

4、生理盐水：100ml；

台盼蓝染色法操作步骤：

1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；

2、用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；

3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液；

4、将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；

5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；

6、染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；

7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；

8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；

9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率。

（细胞活率（%）=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100。）

台盼蓝染色法注意事项：

1、染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色，使监测结果偏低。

2、另可结合细胞计数方法，同时进行细胞计数和活力检测。

3、有潜在致癌危险，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

台盼蓝（Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝，是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率，是组织和细胞培养中常用的死细胞鉴定染色方法之一。