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Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾胶原蛋白I

搜索关键词：

Extracellular Matrix (ECM) 细胞外基质；Gelatin 明胶；Collagen Type I 胶原蛋白I型；Poly-L-lysine 多聚L-赖氨酸；Fibronectin 纤连蛋白；Matrigel基质胶； CAS：9007-34-5 ；

产品信息：

基本介绍：

胶原蛋白是结缔组织和内脏器官细胞外基质的主要构造成分，但在皮肤、肌腱、骨骼中分布为广泛。从遗传和结构上胶原蛋白分为许多类型。胶原蛋白I（Collagen, Type I）是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体，在37℃，中性pH下自发形成三螺旋骨架，是一种优秀的细胞培养用基质，广泛用于肝细胞、成纤维细胞、脊神经节、肌肉细胞、施万细胞、胚肺细胞、上皮细胞和其他大量细胞系。还能用于研究细胞生长、分化、迁移以及发育过程中的组织形态发生。

懋康生物提供的鼠尾胶原蛋白I是根据Birkedal-Hansen方法，通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷suan氢二钠沉淀等步骤制备。可用于包被细胞培养器皿，培养细胞表面粘附性，特别适合那些在普通培养器皿表面不易贴壁的细胞，比如成纤维细胞、肝细胞等原代细胞。还可用于三维胶的制备，模拟真实的生长环境，使得细胞在三维环境中生长。

本品为溶于6mM HAc的无菌溶液，浓度5mg/ml，每个批次产品皆通过细胞培养测试（包括三维空间培养）以保证质量的可靠性。

注意事项

• 整个操作请于冰上进行，因室温鼠尾胶原I可迅速成胶，操作过程尽量保持低温。

• 整个操作请在无菌环境下无菌操作，避免污染以影响细胞生长。

• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 细胞培养器皿的表面包被

组织培养器皿的表面包被推荐浓度为1-5µg/cm²，起始浓度可首玄5µg/cm²。建议根据具体细胞类型来优化。

1.1 6mM HAc稀释液的制备

本品以溶于6mM HAc（=0.36g/L HAc）的无菌溶液形式提供，本身不溶于中性pH，建议用6mM HAc溶液做进一步稀释。

配制方法：取34.5µl 冰醋酸（17.4 M）加入100ml双蒸水，充分混匀后即得到6mM HAc溶液，0.22µm滤膜过滤除菌后待用。

1.2 包被步骤

a，根据自身实验体系以及优化后的包被浓度来计算所需的胶原蛋白量，并加入相应孔内，确保胶原蛋白溶液*覆盖表面。

• 以包被浓度为5µg/cm²，先用6mM HAc稀释液将胶原蛋白（5mg/ml）稀释到合适的中间浓度，如50µg/ml，

然后参考表1 不同培养皿内胶原蛋白加量表 来加量到各孔内；

• 以包被浓度为2µg/cm²，先用6mM HAc稀释液将胶原蛋白（5mg/ml）稀释到合适的中间浓度，如12µg/ml，然后参考表1 不同培养皿内胶原蛋白加量表来加量到各孔内；

表1 不同培养皿内胶原蛋白加量表

b，室温孵育1h，小心吸掉多余液体，用无菌PBS清洗3~4次后直接使用。或者加完胶原蛋白溶液后，在超净台内开盖过夜晾干。无菌条件下，包被好的器皿在4-25℃至少可保存3个月。

2. 三维胶原的制备

当鼠尾胶原蛋白I使用浓度>1mg/ml，pH 7.0左右皆可形成具有一定强度的三维胶，建议成胶浓度为1-2 mg/ml。

由于本品是以溶于6mM HAc的无菌溶液形式提供，在成胶过程需先加入0.06倍体积的0.1M NaOH中和。

2.1 需要溶液准备（无菌、预冷）

2.2 三维胶原制备（不含细胞）（以配制1ml，1mg/ml三维胶为例）：

2.3 三维胶原制备（含细胞）（以配制1ml，1mg/ml三维胶为例）：

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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾胶原蛋白I 细胞培养

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