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Y-PER™ Plus 可透析酵母菌蛋白质提取试剂

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更新时间：2023-05-12 12:01:19浏览次数：60次

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产品简介

Y-PER™ Plus 可透析酵母菌蛋白质提取试剂

详细介绍

Thermo Scientific Y-PER-Plus 可透析酵母菌蛋白质提取试剂可有效裂解酵母菌和细菌细胞，进而提取并溶解蛋白进行分析。

Y-PER Plus 可透析酵母菌蛋白质提取试剂的特点：

•为室温储存而设计的稳定配方
• 只需 20 分钟无干预孵育，即可获得蛋白质提取物
•无需严格的机械破碎或长时间酶处理
• 基于 Tris 的缓冲液具有非常低的离子强度并且不包含氯化钠
• 简单配方不含还原剂或螯合剂
• 可透析配方，可将提取的蛋白交换到下游技术所需的任何缓冲液中
• 与 Thermo Scientific Pierce BCA 和考马斯 Plus 蛋白检测兼容

产品详情（使用建议）：
•新鲜细胞和冷冻细胞：Y-PER-Plus 试剂能够从新鲜收获和冷冻细胞中同等地提取蛋白质
• 细胞密度和菌株变化：生物体成长率、成长温度和培养基成分的差异影响从给定培养容量中采集细胞的数量。因此，含有关用于给定细胞团（湿细胞糊）重量的Y-PER-Plus 试剂量的几条建议。
•毕赤酵母：为实现裂解在如YEPD的富培养基中培养的细胞，必须在对数生长期间采集细胞。为强化固定相细胞裂解，在裂解之前，直接将 DTT 或 TCEP-HCl 添加（分别达到 0.1 M 和 20 至 50 mM 的最终浓度）至 Y-PER-Plus 试剂中，以释放更多的可溶蛋白质。为获得结果，每 1 克细胞团使用 2.5 至 5.0 mL Y-PER-Plus 试剂；按比例相应增加或减少。添加还原剂的另一种替代方法是添加蛋白酶抑制剂并在 45°C 下孵育。
•酿酒酵母：为获得结果，在对数期采集细胞。为增加固定相细胞得率，在提取之前直接将 DTT 或 TCEP·HCl 添加（分别达到 0.1 M 和 20 至 50 mM 的最终浓度）至 Y-PER-Plus 试剂中。无论富培养基或合成培养基，效率结果没有差异。为获得结果，每 1 克细胞团使用 2.5 至 5.0 mL Y-PER Plus 试剂；按比例相应增加或减少。
•粟酒裂殖酵母：为获得结果，请使用原始 Y-PER 试剂（产品编号 78990）从粟酒裂殖酵母中提取蛋白质。
•枯草芽孢杆菌：Y-PER-Plus 试剂不能从枯草芽孢杆菌孢子中提取蛋白质。当使用能够形成孢子的菌株时，在对数期采集细胞。对于不能形成孢子的菌株，可在采集前让细胞成长至饱和态。每 1 g 细胞团使用 2.5 至 5.0 mL Y-PER-Plus 试剂；按比例相应增加或减少。
•大肠杆菌：每 1 g 细胞团使用 2.5 至 5.0 mL Y-PER-Plus 试剂；按比例相应增加或减少。
•酶活性：由于所有蛋白在结构、可溶性和稳定性方面有差异，在有Y-PER-Plus试剂情况下，一种特定的蛋白可能不能保持的活性。例如，原始 Y-PER 试剂可有效测定 β-半乳糖苷酶活性，但 Y-PER-Plus 试剂会降低其动力学。Y-PER-Plus 试剂与 S 转移酶 (GST) 和 His 标签蛋白的标准亲和纯化方案兼容。

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