Mc57G细胞（小鼠纤维肉瘤细胞）

细胞：Mc57G细胞

中文名称：小鼠纤维肉瘤细胞

生长特性：贴壁

培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。

Mc57G细胞传代：

1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。

2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；

（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。

3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

蓝舌病毒(BTV)核酸扩增检测

结果分析判定：

反应结束后，使用手动调整阈值使阴性质控品Ct 值在40以上，Ct 值小于38个循环的为阳性；

Ct值在38-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。重复试验之后，如果Ct 值仍然在38-40个循环之间，判断为阳性，没有荧光值增长为阴性。

质控标准：

阴性质控品：全部阴性

BTV阳性质控品：阳性质控品的 Ct 值均应小于 30，且呈标准S型扩增曲线。

以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效，全部试验应重新进行。

注意事项：

试剂内各种组分使用前应充分融化混匀并经高速短暂离心后试用。每盒试剂请于3次内使用完毕。

试剂须避光保存，以免荧光物质衰减。所有使用的离心管、 Tip 头应用DEPC水处理并高压灭菌，而且必须不含 RNase 。

PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。