人黑素瘤衍生*拉链额外核因子(MLZE)ELISA试剂盒

包装规格：48T/96T

检测方法：酶联免疫

检测标本：血清、血浆、细胞培养液等

本试剂盒仅供科研使用!

试剂盒组成

人黑素瘤衍生*拉链额外核因子(MLZE)ELISA试剂盒   需要而未提供的试剂和器材

1.   酶标仪(450nm检测波长滤光片，570nm或630nm校正波长滤光片) 。

2.   洗板机（可调注液量，保证每孔洗液加至0.35ml而不溢出）。

3.   超净工作台，生物安全柜，通风柜。

4.   高精度单道加液器（量程为0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).

5.   高精度多道加液器（8道或12道，量程为50-300μl).

6.   37℃恒温箱。

7.   低温离心机。

8.   电冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.

9.  漩涡混合仪，低频振荡器等

注意事项

1． 从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

3． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

4． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

5． 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

6.   所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸，使用时必须注意安全。

7.  各步骤加样均应使用加样器，并经常校准其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，*使用排枪加样。

8.  每次试验测定的同时做标准曲线，。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔zui高浓度的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n）。

9.  配制试剂时，要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂，充分混匀对测试结果尤为重要，使用微量振荡器(使用zui低频率)，如无微量振荡器，可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟，例如做圆周动作，使加入孔中的反应液混匀。

10.  实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作，并在使用前充分预热。

11.  手工洗板应注意：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

人黑素瘤衍生*拉链额外核因子(MLZE)ELISA试剂盒   样本要求

1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存或根据存放，时间做相应温度调整，但应避免反复冻融，（由于样本种类过多，每个单位处理方式不一样，本说明书不做详细介绍）。

操作程序

1． 标准品的稀释：（本试剂系统提供原倍标准品一支，用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释）按下表格执行：

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加样:(详细操作流程请客服索要说明书）

4． 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释备用。

5． 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6． 显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。

7． 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

8． 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后10分钟以内进行。

人黑素瘤衍生*拉链额外核因子(MLZE)ELISA试剂盒   结果判断

1.  每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。（若不减零孔值，标准曲线的零孔应相交于Y轴）

2. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种熟悉应用软件来计算。

3．手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。*使用专业制作曲线软件进行分析计算结果。

4．若标本OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。

试剂盒性能

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9200。

2. 灵敏度：zui小可检测浓度达，1.05ng/ml。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

5 . 回收率：70-110%.

6. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

7. 有效期：6个月

8. 检测范围： 480ng/ml -3.9ng/ml

人黑素瘤衍生*拉链额外核因子(MLZE)ELISA试剂盒      其他产品：

  与人凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒相关的ELISA试剂盒产品还有：张女士 苏州系统医学研究所合作单位

　　人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA测定试剂盒，name：Interferon β，IFN-β/IFNB ELISA Kit ，规格：96T/48T   刘 清华大学

　　人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA测定试剂盒，name：transforming growth factors β2，TGFβ2 ELISA Kit，规格：96T/48T   张 内蒙古医科大学

　　人白三烯D4(LTD4)ELISA测定试剂盒，name：leukotriene D4，LT-D4 ELISA Kit，规格：96T/48T   杭州浙二医院   陈

　　人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA测定试剂盒，name：growth hormone relasing factor，GH-RF ELISA Kit，规格：96T/48T   山西临猗李大夫皮肤病专科医院

　　人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA测定试剂盒，name：macrophage chemotatic factor，MCF ELISA Kit，规格：96T/48T   张女士  湖南生物机电职院

　　人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA测定试剂盒，name：Interferon α/βReceptor，IFN-α/βR ELISA Kit，规格：96T/48T  淄博市职业病医院

　　人B细胞生长因子(BCGF)ELISA测定试剂盒，name：B cell growth protein，BCGF ELISA Kit，规格：96T/48T  何老师 天津254医院

　　人可溶性粘附分子(Sam)ELISA测定试剂盒，name：soluble adhesion molecules，Sam ELISA Kit，规格：96T/48T   方  西安德祥商贸有限公司

　　大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)Elisa试剂盒 ，英文名： ProstaticAcidPhosphatase，PAPELISAKit ，规格：96T/48T    东莞市第八人民医院   郝医生

　　大鼠血管紧张素转化酶(ACE)Elisa试剂盒 ，英名： Angiotensinconvertingenzyme，ACEELISAKit ，规格： 96T/48T    胡女士 山东省中医院

　　大鼠尿蛋白(UP)Elisa试剂盒 ，英文名： Proteinuria，UPELISAKit ，规格： 96T/48T    中国农业科学研究所    杨教授

　　大鼠水通道蛋白2(AQP-2)Elisa试剂盒 ，英文名： Aquaporin2，AQP-2ELISAKit ，规格： 96T/48T   复旦大学附属肿瘤医院   舒老师

　　大鼠肌钙蛋白T(Tn-T)Elisa试剂盒 ，英文名： TroponinT，Tn-ISAKit ，规格： 96T/48T    於 华中科院

　　大鼠血管内皮抑素抗体(ES-Ab)Elisa试剂盒 ，英文名： anti-Endostatinantibody，ES-AbELISAKit ，规格：96T/48T   余老师  嘉兴市南湖区中环南路

　　大鼠热休克蛋白27(HSP-27)Elisa试剂盒 ，英文名： heatshockprotein27，HSP-27ELISAKit ，规格：96T/48T   第二军医大学 俞老师

　　大鼠血管抑素/血管稳定蛋白(ANG)Elisa试剂盒 ，英文名： angiostatin，ANGELISAKit ，规格： 96T/48T   宋 海思科制药

　　兔碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)Elisa试剂盒 ，英文名： basicfibroblastgrowthfactor9，bFGF-9ELISAKit ，规格： 96T/48T    周月 西南大学

　　兔E选择素(E-Selectin/CD62E)Elisa试剂盒 ，英文名： E-SelectinELISAKit ，规格： 96T/48T    王老师  山东 济南

　　兔鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)Elisa试剂盒 ，英文名： eosinophilchemotacticfactor，ECFELISAKit ，规格： 96T/48T   秦老师  苏州科技大学

    兔CD30分子(CD30)Elisa试剂盒 ，英文名： Clusterofdifferentiation30，CD30ELISAKit ，规格： 96T/48T   李 深圳森科技有限公司

elisa试剂盒常见实验条件

如何正确使用酶结合物？ 
1.酶结合物的稀释液 
在稀释液中常加入高浓度的无关蛋白质(例如1%BSA或5%脱脂奶粉),通过竞争抑制酶结合物在固相载体上的非特异性吸附.一般还加入能够抑制蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂,如吐温20(0.05%的浓度较为适宜). 

2.正确稀释酶结合物 
酶结合物的合适工作浓度需要通过预实验来确定,浓度过高易导致本底偏高,浓度过低则会导致阳性信号的减弱. 
酶结合物在使用前稀释,稀释后的酶结合物不宜*保存,因为低浓度的酶结合物极易失活.