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上海邦景实业有限公司
主营产品： 进口elisa试剂盒，细胞株，细胞系，菌种 |
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更新时间：2022-11-07 09:49:43浏览次数：212
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操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
商品属性：
产品名称：人胰腺癌细胞：CFPAC-1
货号：BJ-X96379
规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
分类：细胞系
商品介绍：
名称 CFPAC-1 (人胰腺癌细胞) 种属 人类 年龄（性别） 男性，26岁 组织来源 胰腺管腺癌，肝转移 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 背景描述 CFPAC-1细胞是胰腺管腺癌细胞系，建自26岁白人男性囊性纤维变性(CF)的肝转移灶。CFPAC-1细胞表达囊性纤维变性跨膜调节因子(CFTR)，CFPAC-1细胞形态为上皮细胞样且顶端微绒毛极化。CFPAC-1细胞表达胰腺管细胞特征性的细胞角蛋白和癌胚抗原，倍增时间为30-32小时。CFPAC-1细胞是亚3倍体的细胞系，36％的细胞的染色体模式数为75。CFPAC-1细胞传代至24代时，可在免疫抑制小鼠中致瘤。 生物安全等级 1 生长培养基 IMDM＋10% FBS＋1% P/S 推荐传代比例 1:3-1:4 推荐换液频率 2~3次/周 倍增时间 ~30-45小时 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ 致瘤性 Yes, in nude mice (passage 34) 抗原表达情况 CA19-9 antigen, 12000 units/mL, epithelial keratins 基因表达情况 carcinoembryonic antigen (CEA), 9ng/mL; pancreatic oncofetal antigen (POA), 28ng/mL; adenocarcinoma associated antigen (ACAA), 5000ng/mL; CA 19-9 antigen, 12000 units/mL; epithelial keratins 保藏机构 ATCC; CRL-1918 ECACC; 91112501 |
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：产品仅用于科研
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
超快核酸转膜试剂盒5次 酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL
核酸印迹膜染液100mL 酵母 DNAout50 次
超级杂交液 A（不含甲酰胺）100mL 角质细胞生长因子5mL
超级杂交液 B（含甲酰胺）100mL 角质细胞生长因子 - 不含动物成分5mL
超级杂交液 (Oligo 探针 )10mL 角质细胞生长因子 - 不含 BPE5mL
D-二聚体D-Dimer试剂盒 R1：18ml×1 R2：6ml×1 胶乳增强
β-羟丁酸D3-H试剂盒 R1：45ml×2 R2：15ml×2 酶比色法
同型半Hcy试剂盒 R1：37ml×2 R2：10ml×2 酶循环法
补体C3试剂盒 R1：45ml×1 R2：15ml×1 免疫浊度法
补体C4试剂盒 R1：45ml×1 R2：15ml×1 免疫浊度法
人胰腺癌细胞：CFPAC-1大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)elisa检测试剂盒
大鼠粒细胞克隆刺激因子(G-CSF)elisa检测试剂盒
大鼠粒细胞-克隆刺激因子（G-CSF）elisa检测试剂盒
大鼠粒细胞趋化蛋白2(GCP2)elisa检测试剂盒
大鼠连环蛋白β1(CTNNβ1)elisa检测试剂盒
