上海邦景实业有限公司
主营产品: 进口elisa试剂盒,细胞株,细胞系,菌种 |
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参考价 | 面议 |
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更新时间:2022-06-22 15:20:34浏览次数:179
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中文名称:全蛋白提取试剂盒(强)
英文名称:
产品规格:50T|100T
发货周期:1~3天
产品货号:BJ-F0165129
产品介绍:
全蛋白提取试剂盒()用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为烈,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白和磷酸的研究。 操作方法: 1、组织总蛋白的提取 (1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀,放置在冰上备用; (2)称取0.1g的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作; (3)将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中,4℃12000g离心30min; (4)吸取上清至新的管中; (5)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。 (提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。) 2、细胞总蛋白的提取 裂解液的用量:107个细胞需要裂解液1ml; 贴壁细胞:弃去培养基,用冷的PBS洗两次,弃去PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞, 将刮离的细胞裂解液移入EP管中,颠倒裂解20-30min 悬浮细胞:4℃400g离心收集细胞,用冷的PBS洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液, 涡旋10s,放置冰上裂解10min,重复3-4次; 裂解完毕之后,将细胞裂解液4℃12000g离心30min; 将上清移入新的EP管中; 进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。 (提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。) 注意事项: 实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境; PSMF(有毒)现用现加,因为PMSF在水溶液中会快速降解; 储存条件 :-20℃ |
使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
细胞BAX蛋白表达比色法定量检测试剂盒
细胞BAX蛋白表达荧光定量检测试剂盒
BAX蛋白表达西方杂交分析试剂盒
BAX蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
BAX蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
小鼠(ypsin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat protein kinase B (PKB) ELISA Kit 大鼠蛋白B(PKB)elisa
Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISAKit 人腺苷酸环化酶1(AC-1)elisa 96T/48T 进口分装
CLIAKitfor17-OHCSELISAKit大鼠17羟皮质类固醇规格:48T/96T
饮料(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒20次
MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit小鼠白血病抑制因子(LIF)elisa规格:96T/48T
全蛋白提取试剂盒(强)小鼠血管细胞粘附分子1(VCAM1)elisa检测试剂盒
小鼠血管舒缓激肽(BK)elisa检测试剂盒
小鼠血管生长素(ANG)elisa检测试剂盒
小鼠血管生成素样蛋白7(ANGPTL7)elisa检测试剂盒
小鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)elisa检测试剂盒
生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。