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上海邦景实业有限公司
主营产品： 进口elisa试剂盒，细胞株，细胞系，菌种 |
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更新时间：2022-06-13 11:52:17浏览次数：128
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中文名称：Stbl3化学感受态细胞
英文名称：Stbl3 Chemically Competent Cell
产品规格：10×100μl|50×100μl
发货周期：1～3天
产品货号：BJ-F0164599
产品介绍：
Stbl3菌株来源于HB101 E.coli strain，是慢病毒载体系统推荐使用的菌株。 基因组含有重组酶recA13突变，可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率；但不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液。 此菌株具有链抗性，不存在lacIqZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。Stbl3感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19检测转化效率>108cfu/μg DNA。 保存条件：-80℃ 基因型： F-mcrB mrr hsdS20(rB-，mB-)recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR)xyl-5λ-leu mtl-1 endA1+ 操作说明： 1.Stbl3感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中)，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。 2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。 3.向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.培养基，使用其他培养基会降低转化效率。 4.30℃，225 rpm复苏90分钟。(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control PUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟。) 5.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C.培养基上。 6.将平板倒置放于30℃培养箱过夜培养。(若转化control PUC19计算转化效率，则需37℃培养过夜) 注意事项： 1.感受态细胞好在冰上融化。 2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。 |
使用方法：本产品仅用于科研
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由专人(2人)运送，不得邮寄，最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
苯乙醇（PEA）革兰氏阳性细菌选择琼脂平板
伊红甲基蓝（EMB）革兰氏阴性细菌选择琼脂平板
细菌葡萄糖酵解酚红琼脂平板
细菌乳糖酵解酚红琼脂平板
细菌茁糖酵解酚红琼脂平板
小鼠墨蝶呤还原酶(SPR)elisa ，英文名： SPR ELISA Kit
人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA检测试剂盒HumanactivatedproteinCresistance,APCRELISAKit 96T/48T
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP-5)免疫试剂盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 5,IGFBP-5 ELISA kit
英文名称Human6-keto-prostaglandinelisakit人6-同-前列(6-keto-prostaglandin)规格：96T/48T
粪便副伤A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR扩增检测试剂盒20次
ELISAKitTAA人肿瘤相关抗原规格：48T/96T
Stbl3化学感受态细胞兔肾损伤分子-1（Kim-1）elisa检测试剂盒
兔神经肽Y（ NPY）elisa检测试剂盒
兔去甲肾上（ NE）elisa检测试剂盒
兔前列环素2（PGI2）elisa检测试剂盒
兔内皮素（ET-1）elisa检测试剂盒
生物医学实验中，常常需要从液体样品(如血浆，培养基)中纯化病毒，但由于病毒颗粒十分细小，传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来，此操作非常繁琐，并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点，本公司开发了本产品。
