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动物细胞核蛋白微量制备试剂盒

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产品型号:
牌: 联迈生物
厂商性质: 生产商
地: 上海市
更新时间: 2018-06-15 13:13:12
浏览次数: 17
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产品简介

动物细胞核蛋白微量制备试剂盒DNA只存在于细胞核内,因此参与转录调节和DNA复制的蛋白质主要存在于细胞核中,要研究蛋白质与DNA的相互作用,首先需要制备能够与DNA作用的天然细胞核蛋白质。目前、细胞核蛋白质制备方法一般都比较繁琐,一次处理大量样品时尤其不便,为此本公司开发了本产品,用于从哺乳动物组织和培养细胞核蛋白的微量提取,它具有下列特点:
1. 提取制备过程简便,只需要一小时。

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动物细胞核蛋白微量制备试剂盒

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动物细胞核蛋白微量制备试剂盒

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DNA只存在于细胞核内,因此参与转录调节和DNA复制的蛋白质主要存在于细胞核中,要研究蛋白质与DNA的相互作用,首先需要制备能够与DNA作用的天然细胞核蛋白质。目前、细胞核蛋白质制备方法一般都比较繁琐,一次处理大量样品时尤其不便,为此本公司开发了本产品,用于从哺乳动物组织和培养细胞核蛋白的微量提取,它具有下列特点:

1. 提取制备过程简便,只需要一小时。

2. 实验重复性好,尤其适合同时处理多个样品。

3. 可用于培养的动物细胞,也可以用于组织细胞。

5. 制备的核蛋白能保持天然活性,可以直接用于转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA足迹图实验甲基化干扰实验酶活性测定等研究。


RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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