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磷酸化蛋白富集试剂盒

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产品型号:
牌: 联迈生物
厂商性质: 生产商
地: 上海市
更新时间: 2018-06-15 13:25:22
浏览次数: 11
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产品简介

磷酸化蛋白富集试剂盒本产品为高效,它具有如下特点:
1. 特异 ,即使使用细胞培养物裂解液、小鼠组织抽提物等复杂的生物学样品,得到的组分中非特异性蛋白污染也非常少。
2. 快速,使用简单、快速的离心方法,可以在2小时以内完成对磷酸化蛋白的富集。
3. 产量高,比其他的市售试剂盒的产量更高。
4. 方便,试剂盒提供预先分装好的用于富集实验的离心柱、缓冲液、试剂以及超滤柱。

详细介绍

 

磷酸化蛋白富集试剂盒

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磷酸化蛋白富集试剂盒

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本产品为高效,它具有如下特点:

1. 特异 ,即使使用细胞培养物裂解液、小鼠组织抽提物等复杂的生物学样品,得到的组分中非特异性蛋白污染也非常少。

2. 快速,使用简单、快速的离心方法,可以在2小时以内完成对磷酸化蛋白的富集。

3. 产量高,比其他的市售试剂盒的产量更高。

4. 方便,试剂盒提供预先分装好的用于富集实验的离心柱、缓冲液、试剂以及超滤柱。

5. 兼容性好,与质谱、蛋白免疫印迹及2D-PAGE等下游应用兼容。

RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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