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磷酸化蛋白富集试剂盒

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更新时间：2018-06-15 13:25:22浏览次数：202次

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上海联迈生物工程有限公司

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产品简介

磷酸化蛋白富集试剂盒本产品为高效，它具有如下特点：
1. 特异，即使使用细胞培养物裂解液、小鼠组织抽提物等复杂的生物学样品，得到的组分中非特异性蛋白污染也非常少。
2. 快速，使用简单、快速的离心方法，可以在2小时以内完成对磷酸化蛋白的富集。
3. 产量高，比其他的市售试剂盒的产量更高。
4. 方便，试剂盒提供预先分装好的用于富集实验的离心柱、缓冲液、试剂以及超滤柱。

详细介绍

磷酸化蛋白富集试剂盒

名称	规格	价格	手册
磷酸化蛋白富集试剂盒	10次	询价

本产品为高效，它具有如下特点：

1. 特异，即使使用细胞培养物裂解液、小鼠组织抽提物等复杂的生物学样品，得到的组分中非特异性蛋白污染也非常少。

2. 快速，使用简单、快速的离心方法，可以在2小时以内完成对磷酸化蛋白的富集。

3. 产量高，比其他的市售试剂盒的产量更高。

4. 方便，试剂盒提供预先分装好的用于富集实验的离心柱、缓冲液、试剂以及超滤柱。

5. 兼容性好，与质谱、蛋白免疫印迹及2D-PAGE等下游应用兼容。

RNA提取法：试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相，离心后可形成水相层和有机层，这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA，有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤：
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中，每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下，染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会*分离，当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时，变性的质粒DNA又恢复原来的构型，保存在溶液中，而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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