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D-Luciferin（D 荧光素）：有三种，分别是 D-Luciferin, Sodium Salt/D 、D-Luciferin, Potassium Salt/D-荧光素钾盐和 D-Luciferin Firefly,free acid/D-萤火虫荧光素

我公司提供几种常用类型的 D-Luciferin，每批试剂都经过严格的质量验证（经 9 次独立的 HPLC 和 FTIR 标准法监测）和发光效率检测，确保客户每次试验的高重复性和成功性。所有产品都可用于体内成像分析和体外化学发光检测实验。D-Luciferin 是合成的萤火虫荧光素，结构与 promega 公司提供的甲虫荧光素*，是水溶性的萤火虫荧光素酶底物。

（1）D-Luciferin, Sodium Salt/D 荧光素盐

分子式：NaC₁₁H₇N₂O₃S₂·H₂O 分子量：320.32 g/mol 纯度：高级纯（99.7%）

应 用：1）体外化学发光分析（in vitro）；2）活体成像实验（in vivo）；3）高灵敏度 ATP 分析；步 骤：

Protocol 1：In Vitro Bioluminescent Assays/ 体外生物发光检测

1）用 33.3 mL 蒸馏水溶解 1.0 gD-荧光素盐，配制成 100 mM 的储存液（200×，浓度 30mg/ml）。混匀

后立即使用或分装后-20℃冻存。

2）用组织培养基 1∶200 稀释储存液，配置工作液(终浓度 150μg/mL)。

3）去除培养细胞的培养基。

4）待图像分析前，向细胞内添加 1×荧光素工作液，然后进行图像分析。

Protocol 2：In vivo analysis / 活体成像分析

1）用无菌的 PBS（w/o Mg2+、Ca2+）配制 D-荧光素盐工作液(15mg/mL)，0.2um 滤膜过滤除菌。一旦

使用，保持冰冷且避光。

2）注射量取决于注射方式，具体如下：

3）注射入体内 5-10 分钟后，进行成像分析。

（2）D-Luciferin, Potassium Salt/D-荧光素钾盐;

分子式：NaC₁₁H₇N₂O₃S₂·H₂O 分子量：320.32 g/mol 纯度：高级纯（99.7%）

应用：1）活细胞、组织或生物体内 luc 标记基因和荧光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析；2）广泛用于报告基因分析，免疫分析和 ATP 荧光卫生监测分析；

Protocol 1：In Vitro Bioluminescent Assays/ 体外生物发光检测

1）配制成 100 mM 的储存液（200×，浓度 30mg/ml）。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。

2）用预热好的组织培养基 1∶200 稀释储存液，配制工作液(终浓度 150μg/mL)。

3）去除培养细胞的培养基直至无残留。

4）图像分析前立即向细胞内添加 1×荧光素工作液，然后进行图像分析（或者细胞放在 37℃短时间孵育后

检测可增强信号）。

Protocol 2：In vivo analysis in mice / 小鼠活体成像分析

1）用无菌的 DPBS（w/o Mg2+、Ca2+）配制 D-荧光素钾盐溶液(15mg/mL)，0.2um 滤膜过滤除菌。一旦

使用，保持冰冷且避光。

2）按 10 μL/g 体重的浓度向每支小鼠注射相应量的 15mg/mL 荧光素溶液；

3）腹腔注射 10-15 min 后进行成像分析。（对每只动物模型做荧光素动力学研究以确定峰值信号获取时间）

（3）D-Luciferin Firefly,free acid/D-萤火虫荧光素

分子式：C₁₁H₈N₂O₃S₂ 分子量：280.330 g/mol 外观：白色至浅黄色粉末

溶解：0.25%浓度溶解于甲醇，形成近乎无色至浅黄色的清夜  

保存：-15°C 避光

应用：1）活细胞、组织或生物体内 luc 标记基因和荧光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析；

2）广泛用于报告基因分析，免疫分析和 ATP 荧光卫生监测分析；

注意事项

1) 本品（firefly luciferin）和甲虫荧光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid，仅仅是不同公司在命名上的差异。2) 本品保存和操作的过程中都要避光。另外水溶性储存液过滤除菌后，可以-20℃或-80℃分装冻存，避免反复冻融。如果有条件，对储存液充氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存时间更长，长达1年。3) 注射方式，动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定zuijia信号平台期和zuijia的检测时间。4) 荧光素钾盐和荧光素盐应用上没有差别，两者的差别在于物理性状上如外形和溶解性。钠盐的水溶性高于钾盐。从目前发表的文献来看，钾盐的使用率远高于钠盐，尤其是体内实验。两者功效相同。5) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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