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荧光素标记周期素依赖性激酶4抗体IgG

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更新时间:2021-12-28 17:07:42浏览次数:534次

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荧光素标记周期素依赖性激酶4抗体IgG样本的物种 应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy 和 NCBI BLAST 来进行不同物种蛋白同源性比对。
荧光素标记周期素依赖性激酶4抗体IgG一抗宿主物种的选择一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。
         上海谷研生物科技有限公司特殊抗体的保存条件:. 酶联抗体:永远保存在4 度,避免冻起来。否则会导致酶活性的下降或者丧失2. 偶联抗体:所有偶联抗体都是在棕色管中或使用锡箔纸避光保存。尤其是荧光抗体,对光极为敏感,因此在所有的实验阶段也是要避光操作的!3. IgG3 的同型对照:永远保存在4 度,避免冻起来。因为如果出现冻融过程,该抗体非常容易形成多聚体无论是保存还是运输,避免反复冻融!反复冻融会导致抗体变性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力!
           关于加入甘油保存:有些人会加50%的甘油到抗体中来避免反复冻融,甘油在-20 度 会降低冰点。这对很多抗体可能是可行的。但是abcam 仅对非常小的一部分抗体检测过其在这种条件下的稳定性;而abcam 只对按照条件保存的抗体提供质量保证!加入甘油的溶液不建议在-80 度保存,因为这已经超过了甘油的冰点。如果您要加入甘油来保存抗体的话,请谨慎注意无菌操作,避免污染!关于蛋白保护剂:蛋白在高浓度时更不容易降解( mg/ml 或者更高),这就是为什么在抗体中加入BSA 之类作为稳定剂的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。
其它相关信息:
//  CW-2(结肠腺癌细胞) 
CRL-69  A-375 [A375](恶性黑色素瘤细胞) 
//  COLO-320(结肠腺癌细胞) 
CRL-620  A72(胶质母细胞瘤细胞) 
CCL-228  SW480 [SW-480](结肠癌细胞) 
//  SHG-44(胶质瘤细胞) 
HTB-37  Caco-2(结肠腺癌细胞) 
//  U25(胶质瘤细胞) 
CL-88  LS 74T(结肠腺癌细胞) 
HTB-0  SK-N-MC(神经上皮瘤细胞) 
HTB-0  BxPC-3(原位胰腺腺癌细胞) 
CRL-687  KP-N-NS(肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)) 
CRL-687  AsPC-(转移胰腺腺癌细胞) 
//  U-2 OS(骨肉瘤细胞) 
CRL-682  GBC-SD(胆囊癌细胞) 
CRL-682  RD(恶性胚胎横纹肌瘤细胞) 
HTB-96  HCCC-980(胆管细胞型肝癌细胞) 
HTB-96  A-673(横纹肌瘤细胞) 
//  SMMC-772(肝癌细胞) 
CCL-36  SMC-(胸膜细胞瘤) 
CCL-36  QGY-7703(肝癌细胞) 

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