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荧光素标记C-肽抗体IgG

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更新时间:2021-12-28 17:07:42浏览次数:444次

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荧光素标记C-肽抗体IgG样本的物种 应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy 和 NCBI BLAST 来进行不同物种蛋白同源性比对。
荧光素标记C-肽抗体IgG一抗宿主物种的选择一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。
         上海谷研生物科技有限公司特殊抗体的保存条件:. 酶联抗体:永远保存在4 度,避免冻起来。否则会导致酶活性的下降或者丧失2. 偶联抗体:所有偶联抗体都是在棕色管中或使用锡箔纸避光保存。尤其是荧光抗体,对光极为敏感,因此在所有的实验阶段也是要避光操作的!3. IgG3 的同型对照:永远保存在4 度,避免冻起来。因为如果出现冻融过程,该抗体非常容易形成多聚体无论是保存还是运输,避免反复冻融!反复冻融会导致抗体变性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力!
           关于加入甘油保存:有些人会加50%的甘油到抗体中来避免反复冻融,甘油在-20 度 会降低冰点。这对很多抗体可能是可行的。但是abcam 仅对非常小的一部分抗体检测过其在这种条件下的稳定性;而abcam 只对按照条件保存的抗体提供质量保证!加入甘油的溶液不建议在-80 度保存,因为这已经超过了甘油的冰点。如果您要加入甘油来保存抗体的话,请谨慎注意无菌操作,避免污染!关于蛋白保护剂:蛋白在高浓度时更不容易降解( mg/ml 或者更高),这就是为什么在抗体中加入BSA 之类作为稳定剂的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。
其它相关信息:
//  EL4. IL-2(淋巴瘤细胞) 
//  SP2/0(骨髓瘤细胞) 
HB-237  EL4(淋巴瘤细胞) 
//  P3/NSI/-Ag4- [NS-](骨髓瘤细胞) 
CRL-830  PIEC(猪髋动脉内皮细胞) 
CCL-46  CRFK(猫肾细胞) 
CRL-580  EBTr (NBL-4)(牛胚气管细胞) 
TIB-60  F8(猫肾细胞) 
TIB-9  Mv..Lu(NBL-7)(貂肺上皮细胞) 
TIB-8  MDCK (NBL-2)(狗肾细胞) 
//  RF/6A(猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞 ) 
TIB-39  MDBK (NBL-)(牛肾细胞) 
TIB-8  LLC-MK2(恒河猴肾细胞) 
//  B95-8(EBV 转化的绒猴白细胞) 
CCL-94  Vero(非洲绿猴肾细胞) 
CCL-44  COS-7(SV40 转化的非洲绿猴肾细胞) 
//  CV-(非洲绿猴肾细胞) 
CCL-64  COS-(SV40 转化的非洲绿猴肾细胞 ) 
CCL-34  293 [HEK-293] (人胚肾细胞) 
CRL-780  HBL-00(整合SV40 基因的乳腺上皮细胞) 

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