产品名称：【CAS:9015-85-4,T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase】
英文名称：T4 DNA Ligase
CAS号：9015-85-4
级别：BR
分子量：55.3kDa，单体
来源：含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
浓度：1u/ul(200CEU/ul）
活性定义：是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量（weiss单位，1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20ul反应体系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量）
酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液组分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase缓冲液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
50% PEG溶液：50%（w/v）聚乙二醇4000
抑制剂：当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时，可强烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活：65℃加热10分钟或70℃加热5分钟
注意：聚乙二醇（PEG）可*地增加平末端DNA的连接效率，PEG4000在反应体系中的*浓度为5%（w/v）；T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率，为避免此现象，电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下：样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存；转化时，连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%；电转化之前，先用氯仿抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase，然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测：粘性末端或平末端DNA的连接能力
性状：液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP
用途：生化研究。粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性
保存： -20°C
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CAS:97-56-3,邻氨基偶氮甲苯 153260250
CAS:62-56-6，硫脲 1mL 5.0 mg/mL in MeOH Room temperature AS-E0294
6,7,8,9-四氢-5H-苯并环庚-5-酮，826-73-3，>97.0%(GC)，5G| T1347-5G
CAS:540-84-1,异辛烷/2,2,4-*基戊烷 364671000
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2-乙基蒽醌，84-51-5，>98.0%(GC)，25G| E0063-25G
CAS:1195-45-5,4-氟苯基 119600050
CAS:,Forskohlii (Plectranthus barbatus) Root Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE) ASB-00060521-001
CAS:4360-63-8,2-溴甲基-1,3-二氧杂烷 209841000
3-硝基苯肼盐酸盐，636-95-3，25G| N0232-25G
CAS:879-39-0，2,3,4,5-四硝基苯 10mg Room temperature P-1000N
四乙二醇单十二烷基醚，5274-68-0，>98.0%(GC)，5ML| T0769-5ML
3-羟基-4-甲基苯甲酸，586-30-1，5G| H0929-5G
2-氨基-4-甲基苯并噻唑，1477-42-5，>98.0%(T)，25G| A1344-25G
CAS:6080-33-7 ,SINOMENINE HYDROCHLORIDE(P) ASB-00019280-010
2-(对甲苯基)吡啶，4467-06-5，>95.0%(GC)，25G| T1228-25G
4-硝基*，1504-63-8，>98.0%(GC)，1G| N0690-1G
CAS:122-99-6,2-苯氧基乙醇 130240051
CAS:13139-17-8,N-(苄氧基羰酰氧基)琥珀酰亚胺 211171000
4-己基苯胺，33228-45-4，>98.0%(GC)(T)，5G| H0890-5G
CAS:131-17-9,邻苯二甲酸二丙酯 276620025
CAS:,Boneset (Eupatorium perfoliatum) Stem VBRM ASB-00030782-005
内-四氢二环戊二，2825-83-4，>97.0%(GC)，25G| T0409-25G
CAS:24686-78-0,1-苯酰基-4-酮 148150010
CAS:54848-30-5 ,PROTOGRACILLIN(P) ASB-00016312-005
CAS:546-80-5 ,THUJONE, alpha-(-)-(SG) ASB-00020287-100
CAS:402-44-8,4-氟三氟甲苯 187390050
3-乙基苯并噻唑溴化物，32446-47-2，>98.0%(LC)(T)，10G| E0395-10G
咪唑-4(5)-乙酸盐酸盐，3251-69-2，>98.0%(T)，5G| I0229-5G
2,2,4,4-四氟-1,3-二硫杂环丁烷，1717-50-6，>98.0%(GC)，5G| T1776-5G
农残检测混标(9种组分) 1mL 纯度：Varied conc. in Toluene Store at 2-8℃ AE-00021
CAS:15231-91-1,6-溴-2-萘酚 107171000
CAS:7440-22-4，银 500mL 1000 μg/mL in 2-5% Nitric acid Room temperature AA53N-5
4-乙基苯磺酰，16712-69-9，>95.0%(GC)，25G| E0065-25G
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