人浆细胞白血病细胞 NCI-H929 齐一生物科技(上海)有限公司是一家专业生产和销售各种生化试剂,细胞株、原代细胞、菌种、医药中间体,标准品和对照品的大型化学科技公司.齐一生物科技(上海)有限公司:.Web:www.qiyibio。。com
人浆细胞白血病细胞 NCI-H929细胞培养方法
1、收到细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快。
2、收到细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理
3. 收到细胞时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML培养基继续培养:超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心3分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
4,将培养瓶置于37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于4℃冰箱,以备不时之需。
5 、24小时后,细胞形态已恢复并贴满瓶壁,就可以传代了。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般1-3分钟,不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
6,贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37度 5%CO2 培养
7. 收到细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清. 刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到15%去培养。若细胞迏到80%左右 ,血清浓度还是在10%。
培养基参考
500ml基础培养基(含:必需与非必需氨基酸、维他命、有机与无机成分、激素、生长因子与微量元素)、细胞生长添加剂、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/链霉素(P/S)溶液、FBS,适合在饱和湿度为5%CO2与95%空气的培养箱中使用
NDSB-201
NDSB-201
NDSB-211
NDSB-211
ND221
ND221
n-Octyl-b-D-maltoside
n-Octyl-b-D-maltoside
Proteomics Protein Controls-for yeast基因组学标准蛋白
Proteomics Protein Controls -for animal proteins基因组学标准蛋白
EZ-Buffers M 1x BLOK BSA in PBS缓冲液
EZ-Buffers N 1x BLOK BSA in TBS缓冲液
EZ-Buffers O 5x BLOK Casein in PBS缓冲液
Proteomics Protein Controls -for E. coli Proteins基因组学标准蛋白
Proteomics Protein Controls -for plant cell proteins基因组学标准蛋白
Proteomics Protein Control Set基因组学标准蛋白
Mammalian Cell Total Protein Lysis Buffer动物细胞蛋白裂解液
Yeast Total Protein Lysis Buffer酵母细胞蛋白裂解液
Bacterial Lysis Buffer细菌细胞蛋白裂解液
Inclusion body Solublization Buffer包涵体溶解液
RIPA Lysis Buffer IRIPA裂解液I
RIPA Lysis Buffer IIRIPA裂解液II
RIPA Lysis Buffer IIIRIPA裂解液III
RIPA Lysis Buffer IVRIPA裂解液IV
动物细胞用蛋白酶抑制剂复合物I,100X
动物细胞用蛋白酶抑制剂复合物II,10X
Plant Total Protein Lysis Buffer植物蛋白裂解液
Red Cell Lysis Buffer红细胞裂解液
Nondenature Lysis Buffer非变性裂解液
Denature Lysis Buffer变性裂解液
White cell lysis buffer白细胞裂解液
磷酸酶抑制剂复合物 I 100X
磷酸酶抑制剂复合物 II 10X
10%AEBSF溶液
EZ-Buffers A 10XRunning buffer solution缓冲液
EZ-Buffers F (5x)Ponceau S staining solution缓冲液
EZ-Buffers G (5x)India ink staining solution缓冲液
5x一抗/二抗清除液
大鼠白介素3(IL-3)ELISA 试剂盒
大鼠白介素5(IL-5)ELISA 试剂盒
大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA 试剂盒
大鼠瘦素(LEP)ELISA 试剂盒
大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA 试剂盒
大鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA 试剂盒
大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 试剂盒
大鼠单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA 试剂盒
大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 试剂盒
大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 试剂盒
大鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA 试剂盒
大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA 试剂盒
大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA 试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA 试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA 试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA 试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA 试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA 试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA 试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)ELISA 试剂盒
大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA 试剂盒
大鼠骨保护素(OPG)ELISA 试剂盒
大鼠B因子(BF)ELISA 试剂盒
大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA 试剂盒
大鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA 试剂盒
大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA 试剂盒
大鼠L苯解氨酶(PAL)ELISA 试剂盒
大鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA 试剂盒
大鼠可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA 试剂盒
大鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA 试剂盒
大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA 试剂盒
大鼠血管生成素受体Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 试剂盒
大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA 试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA 试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA 试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA 试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA 试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA 试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA 试剂盒
小鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA 试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA 试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA 试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA 试剂盒
大鼠可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA 试剂盒
大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA 试剂盒
大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA 试剂盒