Sodium Salt 双丙氨膦钠盐 抗生素

Bialaphos, Sodium Salt 双丙氨膦钠盐

【除草剂，bar/pat转基因筛选标记】

搜索关键词：除草剂；转基因植物筛选标记；农杆菌转化；草铵膦（Glufosinate Ammonium）草丁膦（phosphinothricin，PPT）；双丙氨膦（Bialaphos）；bar基因；pat基因；草铵膦-N-乙酰转移酶；谷an酰胺合成酶（GS）；CAS：71048-99-2；

订购信息：

除草机制：

双丙氨膦（Bialaphos，也称为Bilanafos）是由几种土壤链霉菌代谢产生的一种天然有机磷三肽抗生素，结构上由两个L-丙an酸残基和一个谷an酸类似物草丁膦（phosphinothricin，PPT；也称为glufosinate）组成。一旦进入正常细胞（不含抗性基因），其内的肽酶水解双丙氨膦，释放草丁膦化合物，从而抑制正常氮代谢和导致胞内氨累积，破坏谷an酰胺合成酶（glutamine synthetase，GS）相关的各种代谢活动，zui终杀死细胞。双丙氨膦不仅是一种广谱除草剂，还能强效抑制革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、和一些真菌类植物病原菌生长。

植物基因工程研究（筛选标志）作用机理：

双丙氨膦可用在许多植物物种（包括小麦，大麦，黑麦，燕麦，水稻和玉米）的转化实验，用来筛选含bar基因（from Streptomyces hygroscopicus）或pat基因（from Streptomyces viridochromeogenes）的转基因工程细胞系，这两种基因都能编码草丁膦N-乙酰转移酶（phosphinothricin N-acetyltransferase），使其转化成为一种无GS抑制活性的化合物，从而使得细胞对双丙氨膦和草丁膦产生抗性。转基因玉米研究，双丙氨膦比草铵膦的活性更强；转基因小麦研究，双丙氨膦是zui可靠的选择标准；酵母基因工程中，双丙氨膦逐渐成为重要的选择标准。

基本特性：

1）CAS NO：71048-99-2

2）同义名：2S-amino-4-(hydroxymethylphosphinyl)butanoyl-L-alanyl-L-alanine, monosodium salt; SF-1293;

3）分子式：C₁₁H₂₁N₃O₆P·Na

4）分子量：345.26 g/mol

5） 外观：白色或浅棕色结晶性粉末

6）纯度：≥95%

7）溶解性：溶于水（10mg/ml）

8） 化学结构式：

应用案例【转基因的小麦幼胚/愈伤组织筛选】（仅作参考）：

1. 使用草铵膦（PPT）或双丙氨膦进行转化细胞的筛选；

2. 粒子轰击（bombardment）后将未成熟幼胚逐个转移到E3培养基，维持培养7-14天；

3. 胚胎转移到含5µg/ml PPT（或双丙氨膦）的MSCB5培养基（*轮筛选用培养基），黑暗培养2周；于这2周内不能正常生长的愈伤组织直接扔弃。

4. 用解剖刀将在MSCB5培养基上增殖的细胞簇解离，亚克隆，转移到含有10 µg/ml PPT（或双丙氨膦）的MSCB10培养基，维持培养4周。

5. 在含5µg/ml或10µg/ml PPT（或双丙氨膦）的培养基上筛选过程的持续周期约为50-75天。将所有培养物放到植物生长培养箱内，设置25 °C，黑暗培养。每一个转基因愈伤组织在含有筛选标志的培养基上zui终生长为大量的胚性愈伤组织。

6. 设置1-10µg/ml PPT（或双丙氨膦）的梯度浓度来测试未转化愈伤组织，以建立更加有效的筛选系统。每一次实验大概准备20个目标培养平板。2个为对照，1个在N6C1上生长以监测培养物的健康情况，另1个在含5-10µg/ml双丙氨膦的N6C1上生长以验证未转化细胞对选择标志的反应。

【注意】：转基因小麦愈伤组织的选择实验中双丙氨膦是有效的筛选标志，然而双丙氨膦不能杀死未转化细胞。为了得到理想的筛选效果，建议低密度（大概每个平板上10个未成熟幼胚）亚培养粒子轰击后的细胞。

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注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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