产品名称:小鼠表面活性物质关联蛋白A(SPA)ELISA检测试剂盒
英文名称:mouse Surfactant Associated Protein A (SPA) ELISA Kit
货号:ZK-M5211
规格: 96T/48T
品牌:子科生物ZIKER
有效期: 4 个月(4℃);8 个月(-20℃)。
保存方法: 2-8℃(频繁使用时); -20℃(长时间不用时)。
服务:子科生物所有的elisa试剂盒均可免费代测,全程Elisa实验技术指导;
小鼠表面活性物质关联蛋白A(SPA)ELISA检测试剂盒实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
小鼠表面活性物质关联蛋白A(SPA)ELISA检测试剂盒实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
小鼠表面活性物质关联蛋白A(SPA)ELISA检测试剂盒11887S PhosphoPlus® β-Catenin (Ser675) Antibody Duet 1Kit Development Antibody Duet -20C
11888S TGF-β Receptor II (D3A1) Rabbit mAb 100µl TGF-beta/Smad Signaling Monoclonal Antibody -20C
11889S PI3 Kinase p55 (D2B3) Rabbit mAb 100µl PI3K / Akt Signaling Monoclonal Antibody -20C
11890S PINCH (5G7) Mouse mAb 100µl Adhesion Monoclonal Antibody -20C
11891S CHD8 (D3C1) Rabbit mAb 100µl Chromatin Regulation / Epigenetics Monoclonal Antibody -20C
11892S Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) 100µl MAPK Signaling Monoclonal Antibody 4C
11893S DARPP-32 (19A3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) 100µl Neuroscience Monoclonal Antibody 4C
11896P UCHL1 (D8R2I) XP® Rabbit mAb 40µl Protein Stability Monoclonal Antibody -20C
11896S UCHL1 (D8R2I) XP® Rabbit mAb 100µl Protein Stability Monoclonal Antibody -20C
11899S Phospho-NDRG1 (Ser330) (D3A12) Rabbit mAb 100µl PI3K / Akt Signaling Monoclonal Antibody -20C
11900S PhosphoPlus® HSP27 (Ser82) Antibody Duet 1Kit Protein Folding Antibody Duet -20C
11901S WIP1 (D4F7) Rabbit mAb 100µl DNA Damage Monoclonal Antibody -20C
11903S PSMB5 Antibody 100µl Protein Stability Polyclonal Antibody -20C
11904P IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb 40µl NF-kB Signaling Monoclonal Antibody -20C
11904S IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb 100µl NF-kB Signaling Monoclonal Antibody -20C
11906S SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA II 300µl Metabolism siRNA -20C
11907S PAI-1 (D9C4) Rabbit mAb 100µl Adhesion Monoclonal Antibody -20C