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细胞名称 SV40转染人成骨细胞；hFOB 1.19
形态特性
生长特性 贴壁生长
特征特性 在0.6mg/mlG418存在下，用温度敏感的表达载体pUCSVisA58转染自然的胎儿四肢组织，建立了此细胞系。 在许可温度33.5oC下细胞分裂很快，而在限制温度39.5oC下细胞极少分裂或不分裂。 这些细胞具有分化为表达造骨细胞表型的成熟造骨细胞的能力。 这些细胞提供了一个同质化的快速增殖模型系统，用于研究正常人造骨细胞的分化，造骨细胞生理和激素，生长因子，和对造骨细胞的功能及分化有影响的细胞因子。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 优质胎牛血清，10%；0.3mg/ml G418
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境：首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。
2、营养物质：细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。
3、温度和pH：细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
4、气体环境：培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
酯、酮）、碱性和中性含氮化合物、硫醇。用途广泛的非离子表面活性剂，在温和的变性条件下用于恢复膜组分。
储存条件：18~25°C，避光防潮密闭干燥。
中文名称：曲拉通X-405
英文名字：Triton X-405
分子式：(C2H4O)n.C14H22O 分子量：294.43
物理性状及指标：
外观：……………………无色至淡黄色液体
溶解性：…………………溶于水
密度：……………………1.096 g/mL at 25 °C
细胞培养测试：…………合格
用途及描述：科研试剂，广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面。曲拉通是一种非离子性、非变性的去垢剂，适用于膜蛋白复合体的增溶、分离和提纯以及凝胶电泳
储存条件：室温，避光防潮密闭干燥。
中文名称：树脂
英文名字：Immobilized Biotin Resin
特点：
Strong affinity for aidin, streptaidin and neutraidin. Reusable resin, at least 10 times.Coalently coupled to limit leaching. Spacer arm:9. For isolatin of aidin, streptaidin and neutraidin coupled molecules. Immunoprecipitations with aidin, streptaidin and neutraidin coupled antibodies.
说明：
Immobilized Biotin Resin is designed for the high affinity chromatography purifications of aidin, streptaidin and neutraidin protein. The resin consists of biotin coupled to 6% cross-linked agarose. Biotin, a 244 Da itamin (itamin H) molecule, exhibits an extraordinary binding affinity for aidin (Ka=1015 M-1) and streptaidin. Biotin and aidin interaction is rapid and once the bond is established it can surie up to 3M guanidine-hydrochloride and extremes of pH. Biotin-aidin bonds can only be reersed by denaturing the aidin protein molecule with 8M guanidine-hydrochloride at pH1.5 or by boiling in SDS-PAGE sample loading buffer.
用途及描述：科研试剂，蛋白纯化与层析
储存条件： 2~8°C
中文名称：盐酸胍
英文名字：Guanidine hydrochloride
分子式：CH5N3.HCl 分子量：95.53
物理性状及指标：
外观：………………………………白色结晶性粉末
熔点：………………………………187-190℃
溶解性：……………………………易溶于水和乙醇
RNase,DNase,蛋白酶：…………不含
炽灼残渣：…………………………<0.1%
纯度：………………………………>99%
pH(5%水, 25°C)………………4.5~6.0
干燥失重：…………………………< 0.05%
用途及描述：科研试剂，广泛应用于分子生物学。强离液剂，用以变性和复性蛋白质。这种强劲的变性剂可以溶解不溶或变性的蛋白，如包涵体。这被用来作为复性到蛋白质或酶复性到活性状态的*步。
储存条件：18~25°C，避光防潮密闭干燥。
中文名称：
英文名字：Kallikrein
物理性状及指标：
外观：……………………冻干粉
样物质：………<0.05
脂肪：……………………<0.1%
激酶：……………………<0.8
炽灼残留：………………<3%
干燥失重：………………<0.2%
用途及描述：科研试剂
储存条件：2~8°C避光防潮密闭干燥。
中文名称：乙二胺四乙酸铁钠盐;EDTA铁钠水合物
英文名字：EDTA, Iron (III), sodium salt
中文名称：杂交液 I
