PCR具有以下特点:
灵敏:配合推荐使用的核酸抽提方案,检测灵敏度达到 10CFU/ml。
可靠:抽提加入内标核酸,全过程质量控制。
稳定:全程闭管操作,无交叉污染。
方便:操作简单,无需电泳步骤。特点
1. 内控对照为独立包装,遵循欧洲药典和日本药典操作流程。
2. 高特异性,一次检测即可涵盖所有常见易感染细胞的支原体物种(包括欧洲药典规定的9种支原体)。与细菌和真核DNA无交叉反应。
3. 高灵敏度,检测限可达到≤10CFU/ml。
4. 有相应配套的支原体基因组DNA和细菌基因组DNA,便于特异性验证。
5.有相应配套的支原体定量标准品,便于最后定量检测。
公司产品仅供科研研究实验!
产品名称 | 规格 | 货号 |
牛白血病病毒PCR检测试剂盒 | 50T | BJ-P7717 |
操作步骤:
第1步:样本处理
a.细胞培养上清
说明:
①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。
②细胞培养物样本含丰富的DNA酶,在低温下也能降解支原DNA,影响检测灵敏度。
建议:样本做DNA抽提处理,实现灵敏度。
第2步:试剂制备
a. 冻干粉溶解
b. 反应体系制备 b1) 样品为细胞上清筛查——反应体系制备
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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