DAPI染色液免疫检测

DAPI染色液免疫检测产品说明：

DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用与荧光显微镜观测。因为DAPI 可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。分子式为C16H15N5·2HCl ，分子量为350.25 ，CAS Nμmber 28718-90-3。

DAPI可以穿透细胞膜与细胞核中的双链 DNA 结合而发挥标记的作用，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和 EB 相比，对双链 DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %)，且对活细胞无毒副作用。DAPI 染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链 DNA 染色。细胞经热激处理后用 DAPI染色 3分钟，在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。

DAPI的大激发波长为340nm，大发射波长为488nm,DAPI和双链 DNA结合后，大激发波长为360nm，大发射波长为460nm。

本DAPI染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。

使用方法：

1.对于固定后的细胞或组织样品，适当洗涤去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可进行免疫荧光染色，染完毕后再进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI染色。

2.对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 DAPI 染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。

3.室温孵育5-10分钟。

4.吸除 DAPI 染色液，用 TBST、PBS或生理盐水洗涤 2-3次，每次 3-5分钟，洗掉未结合的DAPI。

5.用带有 360nm 激发波长，460nm 发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

注意事项：

1.荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

保存条件：-20℃避光保存，一年有效

细胞生物学研究有以下几个方面：

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：

①细胞核、染色体以及基因表达的研究；

②生物膜与细胞器的研究；

③细胞骨架体系的研究；

④细胞增殖及其调控；

⑤细胞分化及其调控；

⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；

⑦细胞的起源与进化；

⑧细胞工程.

细胞生物学研究的常用技术有哪些：

1.显微技术：包括显微观察,显微操作.

2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.

3.细胞工程：细胞培养。

注意事项：

1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，为取得良好的使用效果，*次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。

2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。

3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法，实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。
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