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MCF-7人乳腺癌细胞

参考价 ¥ 3800
订货量 ≥1
  • 公司名称上海西格生物科技有限公司
  • 品       牌
  • 型       号
  • 所  在  地上海市
  • 厂商性质生产厂家
  • 更新时间2020/10/28 17:28:17
  • 访问次数21
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上海西格生物科技有限公司 Shanghai sig Biotechnology Co., Ltd 是一家专注于生物的高新技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。并代理销售Omega、Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE IBL Amresco等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供的科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求。

生化试剂,ELISA试剂盒,血清,标准品,培养基,抗体,分子生物学,细胞,耗材
品牌 其他品牌
MCF-7人乳腺癌细胞
上海西格生物相关产品:
嗜酸乳
6-epi强力霉素,65%(包含未知盐)
MCF-7人乳腺癌细胞 产品信息


      描述:(1)公司可提供新鲜或冻存细胞株;(2)细胞株数量约 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

      发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基;2、说明书及注意事项;3、公司售后服务标准。

      保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜细胞株,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。

cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。

蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。

潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。

产品名称

 MCF-7人乳腺癌细胞

 规格

 T25m2

 货号

 XG-X6327

 

操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 

ZINC PHOSPHATE, MONOBASIC冻干粉中单核细胞增生李斯特氏菌(阴性)anti- ABCF2 antibody人血血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒

tert-ButylMethyl ether冻干粉中志贺氏菌(阴性)anti- ABCG1 antibody人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒

L-HoMoserine;(S)-2-AMino-4-hydroxybutyric acid;Hse乳粉中沙门氏菌(阴性)anti- ABCG4 antibody人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒

N.N-DIMETHYLFORMAMIDE冻干粉中沙门氏菌(阴性)anti- ABHD1 antibody人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒

Paraffin with ceresin乳粉中金黄色葡萄球菌(阴性)anti- ABHD12B antibody人白介素9(IL-9)ELISA试剂盒

2,4-Dinitroaniline;2,4-DinitrobenzenaMine;2,4-DinitrophenylaMine乳粉中金黄色葡萄球菌(阳性)anti- ABHD14A antibody人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒

ZINC FLUORIDE TETRAHYDRATE冻干粉中金黄色葡萄球菌(阴性)anti- ABHD14B antibody人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒

PotassiuM Iodide (AS);Thyroblock;Thyrojod乳粉中菌落总数(空白/无菌样品)anti- ABHD15 antibody人白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒

MCF-7人乳腺癌细胞Human FcγR3A (Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIa Receptor) ELISA Kit1号染色体开放阅读框112抗体anti- PAX4 antibody卵白蛋白(OVA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human ANEA (Anti-Neutrophil Elastase Antibody) ELISA Kit1号染色体开放阅读框113抗体anti- PAX5 antibody基质金属蛋白酶16(MMP16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human CYP1B1 (Cytochrome P450, family 1, subfamily B, polypeptide 1) ELISA Kit 1号染色体开放阅读框114抗体anti- PAX6 antibody白介素10(IL10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human FcεR II (Receptor II for the Fc Fragment of IgE) ELISA KitCD93抗体anti- PAX7 antibody白介素1β(IL1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human FETUA (Fetuin A) ELISA Kit1号染色体开放阅读框106抗体anti- PAX8 antibodyα-血红蛋白稳定蛋白(αHSP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human FGγ (Fibrinogen Gamma chain) ELISA Kit 1号染色体开放阅读框109抗体anti- PAX8 antibody纽蛋白(VCL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human FLOT2 (Flotillin 2) ELISA Kit1号染色体开放阅读框110抗体anti- PAX8-Specific antibody葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Human GC (Glycocalicin) ELISA Kit1号染色体开放阅读框111抗体anti- PAXI antibody癌胚抗原(CEA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

培养步骤:

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

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