描述：(1)公司可提供新鲜或冻存细胞株；(2)细胞株数量约 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、公司售后服务标准。
保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜细胞株，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。
产品名称 | HELF 人胚肺成纤维细胞 |
规格 | T25m2 |
货号 | XG-X6355 |
培养步骤：
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
1,5-Dihydroxynaphthalene酮中特硫溶液标准物质anti- AKR1CL2 antibody人血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒
Sevoflurane Related CoMpound C;1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol固体水分标准物质anti- AKR1D1 antibody人皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒
Malonaldehyde bis(diethyl acetal)固体水分标准物质anti- AKR7A2 antibody人前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒
1-10-Phenanthroline Monohydrate固体水分标准物质anti- AKR7A3 antibody人双睾酮(DHT)ELISA试剂盒
o-Phenanthroline monohydrochloride monohydrate一水合乳糖水分标准物质anti- AKT antibody人促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒
1-Prop-2-enoxy-4-(4-prop-2-enoxyphenyl)sulfonyl-benzene一水合柠檬酸钾水分标准物质anti- AKT1 antibody人雌激素(E)ELISA试剂盒
1,1'-DIANTHRIMIDE二水合酒石酸钠水分标准物质anti- AKT1 antibody人孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒
NAL-纯度标准物质anti- akt1 antibody人超敏游离雌三醇(uE3)ELISA试剂盒
HELF 人胚肺成纤维细胞Human CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit铜代谢结构域蛋白3抗体anti- PHF14 antibody组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Human CASP8 (Caspase 8) ELISA Kit铜代谢结构域蛋白8抗体anti- PHF17 antibody组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Human CASP4 (Caspase 4) ELISA Kit抗体anti- PHF19 antibody组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Human CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit铜代谢结构域蛋白10抗体anti- PHF2 antibody组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Human CAD (Caspase Activated Deoxyribonuclease) ELISA Kit细胞表面趋化因子受体4相关蛋白2抗体anti- PHF20 antibody组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Human CASP 9 (Caspase 9) ELISA Kit24S－羟化酶anti- PHF21A antibody组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Human CTNNα1 (Catenin, Alpha 1) ELISA Kit 肉棕榈酰基转移酶2抗体anti- PHF5A antibody组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Human CTNNβ1 (Catenin, Beta 1) ELISA Kit 肉氧位基转移酶抗体anti- PHF6 antibody组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
