小鼠25羟基D3（25（OH）D3）ELISA试剂盒

产品简介：

样本类型：血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本

检测方法：双抗夹心法

储藏及保存：2-8度，6个月

检测原理：

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

产品内容：

实验所需仪器及设备：

实验操作流程：

步：试剂盒室温平衡 30min ，然后从铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

第二步：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL。

第三步：样本孔中加入待测样本 50μL；空白孔不加。

第四步：除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

第五步：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。

第六步：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

第七步：每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 O.D 值。

注：

小鼠25羟基D3（25（OH）D3）ELISA试剂盒

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!