组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 超级细菌PCR检测试剂盒厂家 |
规格 | 50T |
货号 | LZP7522 |
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
Dimethyl succinate3-并噻吩-2-羧酸 97%青霉素G钠 1650 U/mg
MAA2-巯基吡啶 98%D-青霉胺 99%
Methyl 4-hydroxybenzoate3-甲氧基二苯胺 98%2-过氧化丁酮 >52%(GC)
Methyl laurate2-并噻唑 98%2-过氧化丁酮 CP
γ-Lilenic acid methyl ester4-甲氧基硫代苯甲酰胺 98%邻苯二甲酸二乙酯 AR,99.5%
Methyl lilenate4-甲基硫代氨基脲 97%草酰二胺 98%
Methyl palmitate3-甲氧基苯酚 97%高岭土 医药级
Methyl stearate2-甲基噻吩 99%(R)-(-)-3-氯-1,2- 97%
TBP2-硝基噻吩 98%(R)-(+)-缩甘油 98%
Isoamyl butyrate4-硫酚 90%(R)-(+)-缩甘油 98%
Benzyl acetate2-萘硫酚 99%(S)-缩甘油 97%
Benzyl benzoate2-硝基二苯硫 98%硫酸安普霉素 分析标准品
Butyl benzoate3,3'-二硝基二苯二硫 98%硫酸安普霉素 95%
Butyl paraben4,4'-二硝基二苯二硫 98%伊维茵素 97%
Butyl oleate4-硝基茴香硫 98%磺酸 99%
TECHN-烯N'-2-羟乙基硫脲 98%苯乙酮 GR,≥99.0% (GC)
去草净(分析标准品,99%)Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663) AntibodyL-enk 亮氨酸脑啡肽抗体
噻虫啉(标准品)Integrin α6 AntibodyLegumain 半胱氨酸蛋白酶抗体
杀虫环标准溶液(10μg/ml,u=7%,基体：甲)Phospho-SHP-2 (Tyr542) AntibodyLefty/TGF beta 4 转化生长因子β4抗体TGF β4
三环唑标准溶液(100μg/ml,u=2%)Phospho-SHP-2 (Tyr542) AntibodyLEF-1 淋巴增强因子-1抗体
三环唑标准溶液(10μg/ml,u=2%)SHP-2 AntibodyLECT1 白细胞衍生化学吸引素抗体
氟乐灵标准溶液(100μg/ml,u=3%)JunB (C37F9) Rabbit mAbLDOC1/BCUR1 癌症亮氨酸拉链下调因子1抗体
草达津(标准品)JunB (P169) AntibodyLDL receptor 低密度脂蛋白受体抗体
(分析标准品,99%)hnRNP L AntibodyLDL 低密度脂蛋白抗体
阿克泰(分析标准品,98%)Myc-Tag (9B11) Mouse mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)LDHD 乳酸脱氢酶D抗体
三唑酮(分析标准品，99.8%)SNIP/p140Cap AntibodyLDHC/Cancer,testis antigen 32 乳酸脱氢酶LDH-C（肿瘤/抗原32）抗体
超级细菌PCR检测试剂盒厂家人血清剥夺反应相关蛋白(SDPR)ELISA试剂盒英文名称：human serum deprivation response,SDPR ELISA Kit*
人血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒英文名称：Human Serum amyloid A，SAA ELISA Kit*
人血清淀粉样蛋白A3(SAA3)ELISA试剂盒英文名称：human serum amyloid A3,SAA3 ELISA Kit*
人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒 英文名称：Human Serum amyloid P，SAP ELISA Kit*
人血清素/血清胺(ST)ELISA试剂盒 英文名称：Human Serotonin,ST ELISA Kit进口/原装
人血清总补体(CH50)ELISA试剂盒英文名称：Human 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit*小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA试剂盒 组装/原装
小鼠磷酸化基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA试剂盒 组装/原装
小鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒 组装/原装
小鼠淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒 组装/原装
