特别提醒：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。
产品名称：漆酶测试盒可见分光光度法
产品规格：50管/24样
检测方法：可见分光光度法
产品货号：BK-01S6938
产品分类：其它系列
商品介绍：
测定意义: 漆酶（Laccase）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。 测定原理 漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基，在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。 |
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备
① 组织样本： 取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min，取上清作为待测液。 【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本： 先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（10 4）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。 ③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。 |
实验方法学：
一、肝素的配制：
市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集：
全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点：
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
1 管 BL21(DE3)plysS大肠杆菌 BL21(DE3)plysS E.coli Strain -80℃保存
2 ug pBaBe-puro pBaBe-puro 低温运输，-20℃保存
HBI创伤弧菌生化鉴定条(GB) 5条/盒
250ML MABT Washing Solution,5X MABT Washing Solution,5X 常温保存
DG-18琼脂 DG-18 Agar 250g
10g L-(+) 乳酸锂盐 Lithium L-Lactate 室温干燥保存
50T 猫PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存
5mL 少突胶质细胞生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
100mL BES Buffer,0.5M,pH7.4 BES Buffer,0.5M,pH7.4 常温保存
10mL 微量核酸沉淀剂 NA Precipitation Solution 室温保存
2 ug pGEX-2TK2-Linker pGEX-2TK2-Linker 低温运输，-20℃保存
漆酶测试盒可见分光光度法Phospho-NDRG1 (Thr346) 磷酸化分化相关基因NDRG1抗体 规格: 0.1mlZO-1 胞质紧密粘连蛋白1抗体（闭锁小带蛋白1） 规格: 0.1ml
COBLL1 Cordon bleu蛋白样1抗体 规格: 0.2mlPhospho-MEK1/2(Ser218/222) 磷酸化丝裂原活化蛋白激激1/2抗体 规格: 0.1ml
MMP-11 基质金属蛋白-11抗体 规格: 0.1mlCNTNAP3 接触蛋白相关蛋白3抗体 规格: 0.2ml
GPD2 线粒体甘油三磷酸脱2抗体 规格: 0.2mlPhospho-PKR (Thr446/451) 磷酸化蛋白激R抗体 规格: 0.1ml
phospho-LKB1(Ser428) 磷酸化丝/苏蛋白激抗体 规格: 0.1mlPhospho-HSL (Ser660) 磷酸化荷尔蒙敏脂肪抗体 规格: 0.1ml
CXorf36 脱羧蛋白体36抗体 规格: 0.2mlDRD1 多巴胺受体D1抗体 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗人分泌型IgA 规格: 0.1mlRabbit Anti-human IgM/FITC FITC标记的兔抗人IgM 规格: 0.3ml
GPRIN2 G蛋白调节诱导神经突增生蛋白2抗体 规格: 0.2mlGDNF Receptor alpha 2 胶质细胞系源性神经营养因子受体α2抗体 规格: 0.1ml
PEPT1 肠道肽转运蛋白1/小肽转运蛋白1抗体 规格: 0.1mlLASS1 寿相关基因lASS1抗体 规格: 0.2ml
phospho-CPLA2(Ser505) 磷酸化胞浆型磷脂A2抗体 规格: 0.1mlTYRO3/MER+SKY 受体酪激抗体 规格: 0.2ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的小鼠抗兔IgM 规格: 0.1mlmucin3/Muc3 粘蛋白-3抗体 规格: 0.2ml
KCNG2 心脏钾离子通道蛋白亚基2抗体 规格: 0.2mlGLP-1 (7-36) 素样肽-1抗体 规格: 0.1ml
注意事项：
1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2，建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用（10μl试剂二原液+60μl蒸馏水）。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是（1）试剂二或试剂四没有现配现用；（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间30min可以延长到40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
