特别提醒：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。
产品名称：土壤漆酶测试盒微量法
产品规格：100管/48样
检测方法：微量法
产品货号：BK-01S6874
产品分类：土壤系列
商品介绍：
测定意义: 漆酶（Laccase）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。 测定原理 漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基，在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。 自备实验用品及仪器 天平、常温离心机、可见分光光度计、微量石英比色皿、震荡仪。 |
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备
① 组织样本： 取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min，取上清作为待测液。 【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本： 先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（10 4）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。 ③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。 |
实验方法学：
一、肝素的配制：
市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集：
全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点：
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
50T 新城疫病毒PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存
200 mL 大鼠单核细胞分离液1.082 Cell Separation Solution -20℃保存
50T 病毒H7亚型PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存
5mL MgSO4溶液，10mM，PCR级 MgSO4 ，PCR Grade -20℃保存
2 ug pLentG-KOSM pLentG-KOSM 低温运输，-20℃保存
脑-心浸萃琼脂 Brain-extracted agar Baptist Heart 250g
1瓶 ME-180细胞株 ME-180 低温运输和保存
CCFA琼脂基础 CCFA Agar Base 250g
5g 腺 Adenine 常温保存
250mL TE Buffer,pH8.0 TE Buffer,pH8.0 常温保存
100µL 小鼠抗MBP标签单抗 Anti MBP-Tag Mouse MAb -20℃保存
土壤漆酶测试盒微量法EDG4/LPA2 溶磷脂酸受体蛋白2抗体 规格: 0.2ml
NOX5 还原型辅Ⅱ氧化5/嘌呤二核苷酸磷酸抗体 规格: 0.2ml
ECT2 上皮细胞转化蛋白2抗体 规格: 0.1ml
SMARCA1/SNF2L 解旋SNF2L抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗牛IgM 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗大鼠IgG 规格: 0.1ml
V.cholera Ogawa 01群小川型抗体 规格: 0.2ml
ANKRD20A3 锚蛋白重复结构域蛋白20A3抗体 规格: 0.2ml
GM-CSF 粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子抗体 规格: 0.1ml
XPC DNA补充修复XPC细胞蛋白抗体 规格: 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml
Tuberin/TSC2 马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 规格: 0.2ml
注意事项：
1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2，建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用（10μl试剂二原液+60μl蒸馏水）。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是（1）试剂二或试剂四没有现配现用；（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间30min可以延长到40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
