免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-Cathepsin L/CTSL
中文名称 组织蛋白酶L抗体科研抗体
别 名 Cathepsin L heavy chain; Cathepsin L light chain; CathepsinL; CATL; CTSL; CTSL protein; DKFZp686A18159; FLJ31037; Major excreted protein; MEP; cath-L; CL.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
产品类型 一抗
研究领域 激酶和磷酸酶 合成与降解
蛋白分子量 predicted molecular weight: 19/30/37kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Cathepsin L C-terminus
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+”表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
猪染色盒同源物3(CBX3)酶联免疫吸附测定试剂盒菲啰一钠盐二吡咯烷(N-琥珀酰亚氨氧)碳六氟磷盐 98%金属镓 99.99999% metals basis
猪糖化蛋白(GSP)酶联免疫吸附测定试剂盒 菲啰一钠盐代磷二苯酯 97%氧化钆 SP
猪食欲素/阿立新A(OXA)酶联免疫吸附测定试剂盒芴HBTPyU 纯度≥98%氧化钆 99.9% metals basis
猪血管紧张素I(ANG I)酶联免疫吸附测定试剂盒 5-羟糠2-氟-1,3-二化咪唑翁六氟磷酯 97%氧化钆 99.99% metals basis
猪富含半胱氨型性蛋白(SPARC)酶联免疫吸附测定试剂盒5-羟糠四氟代脲六氟磷酯 98%氧化钆 9.8% metals basis,<100 nm (XRD)
猪α1-B-糖蛋白(α1BG)酶联免疫吸附测定试剂盒5-羟糠9-芴-N-琥珀酰亚碳酯 98%氧化锗 SP
猪髓过氧化物酶抗体(Anti-MPO)酶联免疫吸附测定试剂盒六氨和化钴糠酰 97%氧化锗 99.99% metals basis,200目
猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)酶联免疫吸附测定试剂盒六氨和化钴苯并三氮唑-N,N,N',N'-四脲六氟磷酯 99%硝钆,六水 AR,99%
猪损伤分子1(KIM-1)酶联免疫吸附测定试剂盒乙钠3-羟-1,2,3-苯并三-4(3H)- 98%硝钆,六水 99.99% metals basis
猪P27蛋白(P27)酶联免疫吸附测定试剂盒乙钠2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟磷酯 99%硝钆,六水 99.999% metals basis
猪血小板因子4(PF4)酶联免疫吸附测定试剂盒海1-羟-7-偶氮苯并三氮唑 99%氧化钬 99.99% metals basis
猪硫软骨素(CS)酶联免疫吸附测定试剂盒 海N-羟-5-降稀-2,3-二酰亚 99%铪粒 99.9% metals basis,1-10mm
猪血浆抗凝蛋白C(PC)酶联免疫吸附测定试剂盒 海1,2-二氢-2-异丁氧喹啉-1-异丁酯 98%纳米氧化钬 99.9% metals basis,<100 nm particle size (BET)
猪α1性糖蛋白(α1-AGP)酶联免疫吸附测定试剂盒草亚铁二水合物对苯二单酯 97%氧化铪(IV) 99.99% metals basis
猪磷脂酶C(PLC)酶联免疫吸附测定试剂盒 乙镧S--L-半胱氨亚砜 99%钬锭 99.9% metals basis
猪酪氨酶(TYR)酶联免疫吸附测定试剂盒乙镧1-(均三苯-2-砜)-3-硝-1,2,4-三唑 99%碳化铪 99.5%,Zr <1% ,325目
组织蛋白酶L抗体科研抗体兔质金属蛋白酶12(MMP-12)酶联免疫吸附测定试剂盒IL-29(human Interleukin 29) ELISA Kit 人白介素29
兔S100钙结合蛋白B (S100B)酶联免疫吸附测定试剂盒 IL-23(Human Interleukin 23) ELISA Kit 人白介素23
兔内皮蛋白C受体(EPCR)酶联免疫吸附测定试剂盒MIF(Human Macrophage Migration Inhibitory Factor) ELISA Kit 人巨噬移动抑制因子
兔凝血因子V(F5)酶联免疫吸附测定试剂盒 TFPIHuman Tissue factor pathway inhibitor ELISA Kit 人组织因子途径抑制物
兔尿游离皮质(UFC)酶联免疫吸附测定试剂盒 IP-10/CXCL10(Human interferon-inducible protein 10) ELISA Kit 人干扰素诱导蛋白10
兔补体因子8b(C8b)酶联免疫吸附测定试剂盒 IL-1(Human Interleukin 1) ELISA Kit 人白介素1
兔降钙素因相关肽(CGRP)酶联免疫吸附测定试剂盒 IL-17(Human Interleukin 17) ELISA Kit 人白介素17
兔膜聚糖(LUM)酶联免疫吸附测定试剂盒IL-1 Beta(Human Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 人白介素1β