免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-CK7
中文名称 细胞角蛋白7抗体规格
别 名 Cytokeratin 7; CK 7; K7; Keratin 7; Keratin,type II cytoskeletal 7; KRT7; SCL; K2C7_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 信号转导 细胞类型标志物
蛋白分子量 predicted molecular weight: 54kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from the middle of human CK7
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+”表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
猴β-黑色素激素(βMSH)酶联免疫吸附测定试剂盒 二化铂茄链格孢菌用途: 与紫穗槐共生固氮
猴蛋白激酶C-γ(PKCγ)酶联免疫吸附测定试剂盒2,5-吡啶二羧根瘤菌用途: 与白三叶草共生固氮
猴表皮生长因子(EGF)酶联免疫吸附测定试剂盒2,5-吡啶二羧三叶草根瘤菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
猴锌结合α2-糖蛋白1(αZGP1)酶联免疫吸附测定试剂盒2,5-吡啶二羧平菇拉丁属名: Escherichia coli
猴Runt相关转录因子2(RUNX2)酶联免疫吸附测定试剂盒2-溴噻吩大肠埃希氏菌拉丁属名: gallinarum
猴趋化素样因子超家族成员7(CKLFSF7)酶联免疫吸附测定试剂盒2-溴噻吩鸡伤寒沙门氏菌用途: 食用兼药用
猴载脂蛋白H(ApoH)酶联免疫吸附测定试剂盒 2-溴噻吩贝叶多孔菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
猴促胰液素(SCT)酶联免疫吸附测定试剂盒2-溴-4-氟苯樟疫霉用途: 生产代谢产物
猴血管内皮生长因子B(VEGF-B)酶联免疫吸附测定试剂盒2-溴-4-氟苯链格孢菌拉丁属名: Streptomyces albus subsp. albus
猴葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)酶联免疫吸附测定试剂盒 2-溴-4-氟苯白色链霉菌白色亚种拉丁属名: Enterobacter cloacae
猴激肽释放酶6(KLK6)酶联免疫吸附测定试剂盒 2-氨-4-苯硫酚阴沟肠杆菌拉丁属名: Rhizopus microsporus var. oligosporus
猴白弹性蛋白酶(HLE)酶联免疫吸附测定试剂盒 2-氨-4-苯硫酚小孢根霉少孢变种拉丁属名: Cellulomonas carbonis
猴磷化外信号调节激酶(pERK)酶联免疫吸附测定试剂盒2,4,6-三氨嘧啶碳纤维单胞菌拉丁属名: Enterobacter cloacae subsp. cloacae
猴蛋白C抑制剂(PCI)酶联免疫吸附测定试剂盒2,4,6-三氨嘧啶阴沟肠杆菌(阴沟肠杆菌阴沟亚种)拉丁属名: Enterococcus faecalis
猴内肽2(EM2)酶联免疫吸附测定试剂盒 4-吡啶粪肠球菌用途: 抗病性鉴定,抗病育种,分子标记
猴小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)酶联免疫吸附测定试剂盒4-吡啶大丽花轮枝孢(棉花黄萎病菌)规格: 冻干物
细胞角蛋白7抗体规格兔鸟苷酸交换因子(GEF)酶联免疫吸附测定试剂盒 FS(Human Follistatin) ELISA Kit 人卵泡抑素
兔脑多巴神经营养因子(CDNF)酶联免疫吸附测定试剂盒 TAb(Human Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit 人甲状腺素抗体
兔神经型一氧化氮合酶(NOS1/nNOS)酶联免疫吸附测定试剂盒CA(Human catecholamine) ELISA Kit 人儿茶酚
兔Preptin 蛋白(Preptin)酶联免疫吸附测定试剂盒Cys-C(Human Cystatin C) ELISA Kit 人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C
兔轻肽铁蛋白(FTL)酶联免疫吸附测定试剂盒AChRab(Human acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 人乙酰胆碱受体抗体
兔BTG3关联核蛋白(BANP)酶联免疫吸附测定试剂盒5-HT(Human 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 人5羟色
兔核糖核酸酶III(RNASEN)酶联免疫吸附测定试剂盒 INH-A(Human Inhibin) ELISA Kit 人抑制素A
兔丝氨酸/苏氨酸激酶39(STK39)酶联免疫吸附测定试剂盒 SHBG(Human sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 人性激素结合球蛋白