免疫原
拟南芥ACC基因重组UniProt: P56765, TAIR:ATCG00500
主机的兔子
单克隆多克隆
纯度血清
格式冻干
数量100µl
重建时加入无菌水100µl
为恢复需要,加入无菌水100µl。冻干抗体可在-20或-80℃保存。一旦重组,就进行分配,以避免反复的冻融循环。请记住旋转管简单之前,打开他们,以避免任何损失,可能发生的材料粘附到帽或管的侧面。
Western blot (WB)
推荐稀释1:25 00 (WB)
预计|明显MW 55,63 kDa
用含50 мM hepe - koh、pH 7.5、330 мMshanlichun、2 мM EDTA、1 мM MgCl 2,5 мM、0.05% BSA的缓冲液提取14龄拟南芥幼苗可溶性蛋白20 μg,在70℃变性5 min。样品用10% SDS-PAGE分离,在20%甲醇存在的标准转移缓冲液中,用半干转移(Bio-Rad)印迹1h至硝酸纤维素膜(Amersham prolan)。在阻断步骤之前,用1% Ponceau S染色检查蛋白转移到膜上。在室温下,用5%牛奶在TBS中阻断印迹1h,然后在一抗中搅拌稀释1:3 000孵育1h。将抗体溶液倒出,将印迹简单冲洗两次,然后在TBS-T中洗涤一次15分钟,搅拌3次5分钟。将印迹用二抗(山羊抗兔IgG,马萝卜过氧化物酶偶联,AS09 602, Agrisera)稀释至1:50 000 (Agrisera),在室温下搅拌1h。如上所述,用化学发光检测试剂或Agrisera ECL超亮检测试剂(AS16 ECL- s)洗涤印迹并显像5分钟。使用C-DiGit扫描仪(LI-COR)获得印迹图像。