免疫原
重组PaO基因来自拟南芥Q9FYC2, At3g44880
主机的兔子
单克隆多克隆
纯度血清
格式冻干
量50µl
重建时加入无菌水50µl
冻干/复配保存于-20°C;一旦重组,就进行分配,以避免反复的冻融循环。请记住旋转管简单之前,打开他们,以避免任何损失,可能发生的材料粘附到帽或管的侧面。
Western blot (WB)
推荐稀释倍数:5000 (WB)
预期|明显MW
61 | 54 kDa
野生生态型哥伦比亚拟南芥(Arabidopsis thaliana Columbia)在连续光照条件下生长4周,然后转到*黑暗条件下生长5天。几片树叶从植物收割前转移到黑暗(0 d)或之后他们保持五天(5 d)。蛋白质提取与SDS提取解决方案包含50毫米三(pH值6.8),10% (w / v)甘油,2% (w / v) SDS和6% (v / v) 2-mercaptoethanol。将相当于1mg叶片材料的蛋白提取液装载,在14% SDS-PAGE上分离,与PVDF印迹1h。用含1.5%脱脂牛奶的PBS-T在室温(RT)搅拌下阻断印迹1h。印迹与一抗中稀释1:10 000,在RT中搅拌1h。倒出抗体溶液,将印迹简单冲洗两次,然后在PBS-T中冲洗一次15分钟,搅拌3次5分钟。印迹用二抗(抗兔IgG,马萝卜过氧化物酶标记,来自GE Healthcare)稀释至1:20 000,在室温下搅拌1h。按照上述方法洗涤印迹,并根据制造商的说明,使用ECLplus冲洗1分钟。曝光时间为5min。