菌落总数测试片 24片/包
水质检测仪
便携式气体检测仪
菌落总数测试片检测方法
方法编号：5011
1 适用范围：可用于各类食品及原料中菌落总数的测定。也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。
2 方法原理：将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑(TTC)显色剂等加载在试纸片，经加样、培养后，细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑，通过计数报告结果。
3 操作方法
3.1样品处理：无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，经充分振摇(均质)做成1:10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，用1mL灭菌吸管反复吸吹制成1:100的稀释液。以此类推，做出1:1000等稀释度的稀释液，每个稀释度更换一支灭菌吸管。
3.2接种：一般食品选2～3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将测试片放在水平台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，均匀加到的纸片上，轻轻将上盖膜放下，静置5 min使培养基凝固，zui后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。
3.3培 养： 将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。
4 结果判断与计数：
4.1细菌在纸片上生长后会显示红色斑点，选择菌落数适中(10个～100个)的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在100以内时，按实有数报告。大于100时，用二位有效数字，二位有效数字后面的数字，以四舍五入方法计算，并以10的指数来表示。
4.2计数原则与报告方式
4.2.1 通常选择菌落在10个～100个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之(见下表中例次1)。国家标准菌落总数报告方式术语为cfu/g或mL，cfu的含义为菌落形成单位。
4.2.2 若有两个稀释度的菌落数在10个～100个之内，两者的比值小于2，则取其平均数，若大于2，则采用稀释度小者报告(见下表中例次2和例次3)。
4.2.3 若三个稀释度的菌落数都有在10个～100个之内时，应选择二个低数值的平均数(见下表中例次4)。
4.2.4 若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时，应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数；或采用均小于数量标准的zui小值，或采用均大于数量标准的zui大值(见下表中例次5和例次6)。
例次
稀释度
两稀释
度之比
选定计数
稀释度
报告方式
(个/g或
个/mL)
10-1
10-2
10-3
1
2
3
4
5
6
158
208
265
98
8
295
76
68
82
50
5
174
5
12
50
15
1
106
—
1.8
6.1
—
—
—
10-2
10-2、10-3
10-2
10-1、10-2
10-1
10-3
7.6×103
9.4×103
8.2×103
3.0×103
8.0×10
1.1×105
5 表面取样方法：加1mL灭菌生理盐水在测试片上，静置至少1h使培养基凝固；提起上层膜，使滤纸部分贴到待测物表面，用手在外侧轻压；然后将上盖膜合上，置培养箱内培养。
6 注意事项：使用过的纸片上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理
