原代细胞VS细胞系:
用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说,从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞,绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关),再加上取材,成本等因素,通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。
商品属性:
组织来源 | 皮肤组织 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
产品货号 | CS-X3234 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介:
人表皮成纤维分离自皮肤组织;表皮位于动物皮肤的外层,由胚胎时期外胚层形成,具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构,由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层,即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介:
公司实验室分离的人表皮成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
质量检测:
公司实验室分离的人表皮成纤维采用先蛋白酶消化、后-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
原代细胞一般传至10代左右,大部分细胞衰老死亡,但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,存活的细胞一般能够传到40-50代,叫细胞株。当50代以后又会出现“危机”,这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点,从而可能无限制地传代下去,称为细胞系。
也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系,因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞,广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法,从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。
细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点,也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。
公司正在销售的产品:
小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human ai double sanded DNA aibody / natural aibody DNA (dsDNA) ELISA Kit 人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒
Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISAKit 人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforACE(HumanAngiotensinconveingenzyme)ELISAKit人血管紧张素转化酶规格:48T/96T
药品环(cyclamate)含量薄层色谱法定性检测试剂盒20次
MousePeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
鸭子胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸭子白介素12(IL-12)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸭子β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠S100-A5蛋白(S100A5)ELISA试剂盒 ,英文名: S100A5 ELISA Kit
Rabbit adrenomedullin (ADM) ELISA Kit 兔子肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒
ELISA 小复合物(mouse TAT) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforIFN-Beta/IFNB(HumanIerferonBeta)ELISAKit人β干扰素规格:48T/96T
通用型H5N1试剂盒20次
ELISAKitVB6大鼠维B6规格:48T/96T
LAYN重组食蟹猴 Layilin / LAYN 蛋白 (His 标签) Protein
MBP(Myelin Basic Protein, MBP 68-86 0.5mgMBP(Myelin Basic Protein, MBP 68-86) 髓鞘碱性蛋白(多肽抗原)
CD28重组人 CD28 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein
CASK Protein Human 重组人 CASK Kinase 蛋白
IL17A Protein Mouse 重组小鼠 IL17 / IL17A 蛋白
人表皮成纤维细胞MBP(Myelin Basic Protein, MBP 68-86 0.5mgMBP(Myelin Basic Protein, MBP 68-86) 髓鞘碱性蛋白(多肽抗原)
CASK Protein Human 重组人 CASK Kinase 蛋白
LAYN重组食蟹猴 Layilin / LAYN 蛋白 (His 标签) Protein
IL17A Protein Mouse 重组小鼠 IL17 / IL17A 蛋白
CD28重组人 CD28 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein
原代细胞培养的具体步骤:
1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分钟。
5、消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6、分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500-1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7、计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2-7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8、培养:置于37℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞,纱布塞易生霉菌,每次换液时需要换新塞。