人肺成纤维细胞

原代细胞VS细胞系：

用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

人肺成纤维细胞

商品属性：

细胞简介：

人肺成纤维分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持肺器官的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。

方法简介：

公司实验室分离的人肺成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

公司实验室分离的人肺成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞一般传至10代左右，大部分细胞衰老死亡，但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去，存活的细胞一般能够传到40-50代，叫细胞株。当50代以后又会出现“危机”，这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点，从而可能无限制地传代下去，称为细胞系。

也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系，因此，细胞系狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。

细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点，也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。

公司正在销售的产品：

小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA 试剂盒 96T/48T

Human ai parietal cell aibody (AGPA/PCA) ELISA Kit 人抗胃壁细胞抗体(AGPA/PCA)ELISA试剂盒

HumanProteoglycan,PGELISAKit 人蛋白聚糖(PG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforACA-IgGELISAKit大鼠抗心0脂抗体IgG规格：48T/96T

耶尔森氏菌属(Yersinia)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20次

MouseOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit小鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

血小板衍化生长因子-AB   英文名称：   plateler-derived growth factor AB   规格：   48T/96T   英文缩写：   PDGF-AB

血小板衍化生长因子-BB   英文名称：   plateler-derived growth factor BB   规格：   48T/96T   英文缩写：   PDGF-BB

程序性死亡因子1   英文名称：   programmed death 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   PD1

旁分泌的方式分泌血小板源性生长因子受体β   英文名称：   Platelet-derived growth factor receptor beta   规格：   48T/96T   英文缩写：   PDGF Rβ

大鼠蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒 ，英文名： PP ELISA Kit

Porcine vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒

病毒通用型核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 48T

CLIAKitforLptn/LTN/XCL1(Humanlymphotactin)ELISAKit人淋巴细胞趋化因子规格：48T/96T

通用免疫化学封闭溶液100毫升

ELISAKitMYO/MB鸡肌红蛋白规格：48T/96T

CD14重组大鼠 CD14 蛋白 (His 标签) Protein

Connexin-43(Cx43 0.5mgConnexin-43(Cx43) 间隙连接蛋白43(多肽片断抗原)

HNMT重组人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 标签) Protein

CCDC134 Protein Human 重组人 CCDC134 蛋白 (His 标签)

CLEC6A Protein Mouse 重组小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 (His 标签)

人肺成纤维细胞Connexin-43(Cx43 0.5mgConnexin-43(Cx43) 间隙连接蛋白43(多肽片断抗原)

CCDC134 Protein Human 重组人 CCDC134 蛋白 (His 标签)

CD14重组大鼠 CD14 蛋白 (His 标签) Protein

CLEC6A Protein Mouse 重组小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 (His 标签)

HNMT重组人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 标签) Protein

原代细胞培养的具体步骤：

1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。

3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分钟。

5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。

7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。

8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。