原代细胞VS细胞系：
用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。
商品属性：
组织来源 | 肺静脉组织 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
产品货号 | CS-X2697 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介：
人肺大静脉平滑肌分离自肺大静脉组织；肺大静脉在用肺呼吸的脊椎动物中，把动脉血由肺送回心脏的静脉，是一个静脉里流动脉血的血管。左右1对，共4条，两条连接右肺，两条连接左肺。肺静脉异位引流是指肺静脉未能直接与左心房连接，而与右心房或体静脉系统连接的先天性心血管异位。肺静脉淤血性肺动脉高压，是由于肺静脉内血液淤滞而引起的肺动脉高压。正常情况下，肺循环具有血压低、阻力小和顺应性大的特点，肺动脉压力高低取决于单位时间内肺动脉血流量和肺血管的阻力，要维持肺循环的低压、低阻的状态，必须保证整个肺循环系统的畅通无阻，血液顺利地由肺动脉经毛细血管进入肺静脉，再入左心室，经过左心室收缩进入体循环，才能避免肺动脉内压力升高。肺大静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。该细胞参与血管壁炎症反应，保持静脉管腔的通畅，还是多数动脉疾病的靶细胞。
方法简介：
公司实验室分离的人肺大静脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
质量检测：
公司实验室分离的人肺大静脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
原代细胞一般传至10代左右，大部分细胞衰老死亡，但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去，存活的细胞一般能够传到40-50代，叫细胞株。当50代以后又会出现“危机”，这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点，从而可能无限制地传代下去，称为细胞系。
也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系，因此，细胞系狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。
细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点，也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。
公司正在销售的产品：
小鼠粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human ai hepatitis B virus e aibody (HBeAb) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)ELISA试剂盒
HumanexteinELISAKit 人外显肽(extein)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforABAb(Humanai-braiissueaibody)ELISAKit人抗脑组织抗体规格：48T/96T
(0.05%)乙四乙酸混合液100毫升
Mouseneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit小鼠粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
血小板活化因子 (PAF) 作用： ELISA 规格： 96T
血小板衍化生长因子 -AA(PDGF-AA) 作用： ELISA 规格： 96T 美国 R&D
血小板衍化生长因子 -AB(PDGF-AB) 作用： ELISA 规格： 96T 美国 R&D
血小板衍化生长因子 -BB(PDGF-BB) 作用： ELISA 规格： 96T 美国 R&D
大鼠释放激素(GH)ELISA试剂盒 ，英文名： GH ELISA Kit
Porcine tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠脑衍化神经营养因子受体(mouse BDNF R) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforL-LDHELISAKit大鼠L-鼠乳酸脱氢酶规格：48T/96T
通用型EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性检测试剂盒20次
ELISAKitBF鸡B因子规格：48T/96T
NA重组甲型流感 H5N1 神经酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
Ractopamine/KLH 莱克多巴胺与血蓝蛋白偶联物 1mgRactopamine/KLH 莱克多巴胺与血蓝蛋白偶联物
GFRA2重组人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 (His 标签) Protein
CCL13 Protein Human 重组人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 标签)
ESAM Protein Human 重组人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白
人肺大静脉平滑肌细胞Ractopamine/KLH 莱克多巴胺与血蓝蛋白偶联物 1mgRactopamine/KLH 莱克多巴胺与血蓝蛋白偶联物
CCL13 Protein Human 重组人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 标签)
NA重组甲型流感 H5N1 神经酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
ESAM Protein Human 重组人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白
GFRA2重组人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 (His 标签) Protein
原代细胞培养的具体步骤：
1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分钟。
5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。
