人骨骼肌成纤维细胞

原代细胞培养条件：

‌温度‌：通常在37℃下进行，以模拟体内温度。

‌pH值‌：培养液的pH值应保持在7.2~7.4之间，以维持细胞的正常生理状态。

‌气体环境‌：在含有5% CO2的培养箱中进行，以促进细胞生长。

‌培养基‌：使用含有适当营养成分的培养基，如Eagle's MEM、DMEM等。

‌无菌操作‌：整个培养过程需要在无菌条件下进行，以防止污染。

本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！

细胞简介：

人骨骼肌成纤维分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞，细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方，细胞多呈梭行，具有一定的方向性。

方法简介：

实验室分离的人骨骼肌成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

实验室分离的人骨骼肌成纤维采用 - 胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

培养基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞培养的具体操作步骤如下：

‌组织处理‌：将动物组织从机体中取出，剪碎后用等消化酶处理，使其分散成单个细胞。

‌细胞计数‌：使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数，确保细胞密度适中。

‌接种培养‌：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量的培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。

‌换液和传代‌：定期更换培养液，当细胞达到一定密度时进行传代培养，以维持细胞的生长状态。

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原代细胞的4种培养方法：

　　① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。