人关节韧带成纤维细胞

本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！

细胞简介：

人关节韧带成纤维分离自关节韧带组织；韧带是纤维结缔组织，将各个骨头在关节处连接起来，并在关节活动时加固关节稳定关节。其中颞下颌关节、踝关 节、膝关节韧带组织研究较多，颞下颌关节两侧各有三条，即颞下颌韧带、茎突下颌韧带和蝶下颌韧带。踝关节周围韧带根据其解剖位置可以分成3组，外侧韧带 ，内侧三角韧带，胫腓联合韧带。膝关节的韧带有囊外韧带和囊内韧带,其共同作用为加强关节的稳定性。囊外韧带主要有:髌韧带位于髌骨的下部，关节囊的前 方,是股四头肌肌腱的延续,向下附着于胫骨粗隆，两侧有侧副韧帶加强；囊内韧带:主要为交叉韧带:前交叉韧带附着于胫骨髁间隆起前份和股骨外侧髁的内侧面 ，防止胫骨过度前移;后交叉韧带附着于胫骨髁间隆起后份与股骨内侧髁的外侧面，防止胫骨过度后移。另外，在膝关节内尚有膝横韧带。任何关节韧带均可由于 外伤而发生损伤，但影响较大又较常见的是膝关节韧带损伤和踝关节韧带损伤。膝关节韧带损伤，常见者为膝关节侧副韧带损伤。多因膝关节微屈时，突然受到 内翻或外翻的冲击力所致。踝关节韧带损伤。多因行走或跑跳时误入不平之处所致。以外侧损伤多见。韧带是致密纤维结缔组织，主要特点是细胞、基质成分少 ，纤维非常多、纤维粗大排列紧密，且排列方向与承受张力的方向一致，有很强的保护和支持作用。韧带主要包含韧带成纤维细胞。人关节韧带成纤维细胞对研究关节韧带损伤有重要意义。

原代细胞培养条件：

‌温度‌：通常在37℃下进行，以模拟体内温度。

‌pH值‌：培养液的pH值应保持在7.2~7.4之间，以维持细胞的正常生理状态。

‌气体环境‌：在含有5% CO2的培养箱中进行，以促进细胞生长。

‌培养基‌：使用含有适当营养成分的培养基，如Eagle's MEM、DMEM等。

‌无菌操作‌：整个培养过程需要在无菌条件下进行，以防止污染。

方法简介：

实验室分离的人关节韧带成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

实验室分离的人关节韧带成纤维采用 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

培养基：基础培养基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞培养的具体操作步骤如下：

‌组织处理‌：将动物组织从机体中取出，剪碎后用等消化酶处理，使其分散成单个细胞。

‌细胞计数‌：使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数，确保细胞密度适中。

‌接种培养‌：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量的培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。

‌换液和传代‌：定期更换培养液，当细胞达到一定密度时进行传代培养，以维持细胞的生长状态。

原代细胞的4种培养方法：

　　① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

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