商品属性:
组织来源 | 眼角膜组织 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
产品货号 | CS-X3103 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介:
人角膜内皮分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜的高度透明性和光学性是正常发挥生理功能的必要条件之一,而角膜内皮细胞(CEC)在维持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜内皮细胞是角膜内层的单层细胞,构成了后弹力层和房水之间的物理屏障,通过离子“泵”功能调节角膜中离子浓度和水分,维持角膜的半脱水状态,保证角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜内皮细胞功能出现紊乱,常导致角膜水肿而使角膜部分甚至失去透明性。角膜内皮细胞主要功能有:①角膜是的无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能;②角膜内皮细胞对角膜透明性有重要作用;③角膜内皮细胞通过Na+-K+-ATP酶活性,维持角膜和房水内Na+梯度,防止水分渗入角膜内,维持角膜实质层相对脱水状态,维持透明性。
方法简介:
公司实验室分离的人角膜内皮经NSE(神经元特异性烯醇化酶)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
质量检测:
公司实验室分离的人角膜内皮采用混合胶原酶消化结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
原代细胞VS细胞系:
用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说,从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞,绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关),再加上取材,成本等因素,通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。
原代细胞一般传至10代左右,大部分细胞衰老死亡,但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,存活的细胞一般能够传到40-50代,叫细胞株。当50代以后又会出现“危机”,这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点,从而可能无限制地传代下去,称为细胞系。
也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系,因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞,广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法,从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。
细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点,也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。
原代细胞培养的具体步骤:
1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分钟。
5、消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6、分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500-1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7、计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2-7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8、培养:置于37℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞,纱布塞易生霉菌,每次换液时需要换新塞。
公司正在销售的产品:
小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human soluble myosin heavy chain 1 (sMHC-1) ELISA Kit 人可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)ELISA试剂盒
Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMAELISAKit 人不对称二甲基精(ADMA)ELISA试剂盒 96T/48T 分装
CLIAKitfor5-HTELISAKit大鼠5羟色胺规格:48T/96T
饮料变质细菌(脂环酸芽孢杆菌属Alicyclobacillus)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20次
MouseLysozyme,LZMELISAKit小鼠(LZM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
型脂肪酸结合蛋白 英文名称: Human hea Fatty Acid Binding Protein 规格: 48T/96T 英文缩写: hFABP
幽门螺旋杆菌免疫球蛋白Y 英文名称: Human Helicobacter pylori IgY 规格: 48T/96T 英文缩写: HP-IgY
甲型肝炎病毒抗体IgG 英文名称: Human Hepatitis A Virus IgG 规格: 48T/96T 英文缩写: HAV IgG
乙型肝炎病毒e抗原 英文名称: Human Hepatitis B e Aigen 规格: 48T/96T 英文缩写: HBeAg
大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒 ,英文名: SCF/MGF ELISA Kit
Porcine ierleukin 2 (IL-2) ELISA Kit 猪白介素2(IL-2)ELISA试剂盒
肉毒杆菌(E/F型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMethylaseELISAKit大鼠甲基化酶规格:48T/96T
体液牛病毒性腹泻病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定量PCR扩增检测试剂盒20次
ELISAKitHpt/HP牛结合珠蛋白/触珠蛋白规格:48T/96T
IL20重组大鼠 IL20 / Interleukin-20 蛋白 Protein
DRD4 receptor peptide 多巴胺受体-D4抗原 0.5mgDRD4 receptor peptide 多巴胺受体-D4抗原
PPM1G重组人 PPM1G / PP2C-gamma 蛋白 (aa 317-546, His 标签) Protein
CD14 Protein Human 重组人 CD14 蛋白 (His 标签)
OMD Protein Mouse 重组小鼠 Osteomodulin / OMD 蛋白 (His 标签)
人角膜内皮细胞DRD4 receptor peptide 多巴胺受体-D4抗原 0.5mgDRD4 receptor peptide 多巴胺受体-D4抗原
CD14 Protein Human 重组人 CD14 蛋白 (His 标签)
IL20重组大鼠 IL20 / Interleukin-20 蛋白 Protein
OMD Protein Mouse 重组小鼠 Osteomodulin / OMD 蛋白 (His 标签)
PPM1G重组人 PPM1G / PP2C-gamma 蛋白 (aa 317-546, His 标签) Protein